潛在轉(zhuǎn)移相關(guān)因子DLL4、YKL-40、MMP-9與胰腺癌預(yù)后關(guān)系的研究.pdf

1、胰腺癌是惡性程度最高的腫瘤之一，目前手術(shù)治療是最有效的方法，然而術(shù)后5年生存率仍然不超過20％。探討術(shù)后早期復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的相關(guān)因素，有助于開發(fā)相應(yīng)臨床治療措施，這將明顯改善患者預(yù)后，并具有重要的臨床意義。
　　 腫瘤周圍血管生成與間質(zhì)重塑在胰腺癌術(shù)后復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移中具有重要作用。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)信號(hào)通路是促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)及腫瘤周圍血管重建的重要途徑之一。研究已證實(shí)Notch信號(hào)通路配體蛋白DLL4是VEGF通路的負(fù)性調(diào)節(jié)

2、因子，通過對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2)的作用而調(diào)控VEGF信號(hào)。抑制DLL4表達(dá)將導(dǎo)致腫瘤組織生成大量無功能血管，造成腫瘤組織血供不足而致其生長(zhǎng)受到抑制。最近的研究顯示DLL4在肺癌等惡性腫瘤中高表達(dá)，并與患者不良預(yù)后顯著相關(guān)。DLL4-Notch信號(hào)通路可能與胰腺癌發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。故推測(cè)DLL4高表達(dá)可能與胰腺癌術(shù)后復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移有關(guān)。
　　 腫瘤細(xì)胞及相關(guān)間質(zhì)細(xì)胞合成、分泌人軟骨糖蛋白39(HC-gp39，YK

3、L-40)和基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)。前期研究表明MMP-9可降解血管基底膜與細(xì)胞外基質(zhì)成分，并正向調(diào)節(jié)VEGF信號(hào)通路以刺激血管發(fā)生；YKL-40蛋白與VEGF信號(hào)通路亦有一定相關(guān)性，可能通過提高VEGFR-2的表達(dá)而增強(qiáng)血管新生。因此，推測(cè)MMP-9、YKL-40高表達(dá)也可能與胰腺癌術(shù)后復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移有關(guān)。
　　 為驗(yàn)證上述研究假設(shè)，明確DLL4、YKL-40、MMP-9與胰腺癌手術(shù)預(yù)后關(guān)系，本課題開展了以下兩個(gè)方面的研究

4、。
　　 一、DLL4與胰腺癌預(yù)后關(guān)系
　　 目的：檢測(cè)DLL4、VEGFR-2蛋白在胰腺導(dǎo)管腺癌組織中的表達(dá)水平及其相關(guān)性，明確兩者對(duì)手術(shù)后患者預(yù)后的影響，并探究DLL4是否具有獨(dú)立預(yù)后價(jià)值。
　　 材料與方法：采用雙向性隊(duì)列研究設(shè)計(jì)。研究對(duì)象來自2005年1月至2009年12月期間長(zhǎng)海醫(yī)院收治的病理確診為胰腺導(dǎo)管腺癌的連續(xù)初診病例。所有患者均經(jīng)手術(shù)治療，術(shù)前未行化療、放療。調(diào)查內(nèi)容包括人口學(xué)特征、個(gè)人生活習(xí)慣

5、、病史、術(shù)前臨床表現(xiàn)、實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果、術(shù)中情況、術(shù)后情況、總生存期、疾病無進(jìn)展生存期等。通過查閱病歷、電話隨訪與門診復(fù)診獲得上述資料。隨訪截止時(shí)間為2010年9月30日。同時(shí)收集研究對(duì)象手術(shù)切除組織的石蠟標(biāo)本，采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)其DLL4、VEGFR-2的表達(dá)情況。采用統(tǒng)計(jì)學(xué)Kaplan-Meier及Cox回歸分析法，評(píng)價(jià)DLL4在癌組織中的表達(dá)變化對(duì)患者生存期的影響，并通過卡方檢驗(yàn)與多因素logistic回歸分析法，明確DLL4

6、表達(dá)水平與TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及VEGFR-2表達(dá)的關(guān)系。
　　 結(jié)果：本研究共隨訪胰腺導(dǎo)管腺癌患者89例，年齡中位數(shù)為58歲(年齡范圍35-78歲)，其中男性占61.8％，隨訪時(shí)間中位數(shù)為12個(gè)月(時(shí)間范圍2-49個(gè)月)。排除術(shù)后一個(gè)月內(nèi)死亡的病例后，共82例患者納入生存分析?；颊咧形豢偵鏁r(shí)間(95％可信區(qū)間)、無進(jìn)展生存時(shí)間(95％可信區(qū)間)分別為12(10.2-13.8)個(gè)月與6(4.3-7.7)個(gè)月。38例(42.7

7、％)患者DLL4高表達(dá)，64例(71.9％)患者VEGFR-2高表達(dá)。
　　 1、DLL4表達(dá)與預(yù)后關(guān)系
　　 單因素分析結(jié)果顯示，總生存時(shí)間、無進(jìn)展生存時(shí)間分別與DLL4表達(dá)、VEGFR-2表達(dá)、CA19-9、血小板計(jì)數(shù)/淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)比值(PLR)、糖尿病病史、手術(shù)切緣狀態(tài)、腫瘤大小、TNM分期、分化程度、術(shù)后化療、術(shù)后放療、術(shù)后并發(fā)癥潛在相關(guān)(P<0.25)；DLL4或VEGFR-2低表達(dá)者預(yù)后優(yōu)于DLL4或VEGF

8、R-2高表達(dá)者(P<0.05)；DLL4低表達(dá)且VEGFR-2高表達(dá)者預(yù)后類似于DLL4低表達(dá)且VEGFR-2低表達(dá)者，但優(yōu)于DLL4高表達(dá)且VEGFR-2高表達(dá)者預(yù)后(P<0.001)。
　　 多因素分析結(jié)果表明，DLL4高表達(dá)、手術(shù)切緣陽性、未行術(shù)后放療、術(shù)后并發(fā)癥均為總生存時(shí)間及無進(jìn)展生存時(shí)間下降的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子(P<0.05)。
　　 2、DLL4表達(dá)與臨床特征關(guān)系
　　 DLL4表達(dá)分別與VEGFR-2表

9、達(dá)、腫瘤大小、TNM分期、腫瘤局部浸潤(rùn)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)等明顯相關(guān)(P<0.05)。
　　 3、DLL4表達(dá)與TNM分期
　　 單因素分析結(jié)果顯示，TNM分期分別與DLL4表達(dá)、VEGFR-2表達(dá)、PLR、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)/淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)比值(NLR)、腫瘤部位潛在相關(guān)(P<0.25)。
　　 多因素分析結(jié)果顯示，DLL4高表達(dá)、低PLR均與高等級(jí)TNM分期顯著相關(guān)(P<0.01)。
　　

10、4、DLL4表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系
　　 單因素分析結(jié)果顯示，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分別與性別、DLL4表達(dá)、VEGFR-2表達(dá)、糖尿病病史、生化指數(shù)潛在相關(guān)(P<0.25)。
　　 多因素分析結(jié)果顯示，DLL4高表達(dá)、高分值生化指數(shù)均與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移明顯相關(guān)(P<0.05)。
　　 結(jié)論：胰腺導(dǎo)管腺癌組織高表達(dá)DLL4與術(shù)后患者生存期下降、高等級(jí)TNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)，故DLL4-Notch信號(hào)通路的靶向治療可能會(huì)改善胰

11、腺癌患者的手術(shù)預(yù)后。
　　 二、YKL-40、MMP-9與胰腺癌預(yù)后關(guān)系
　　 目的：檢測(cè)YKL-40、MMP-9、DLL4蛋白在胰腺導(dǎo)管腺癌組織中的表達(dá)水平，明確三者對(duì)手術(shù)后患者生存期的影響，并探討與腫瘤TNM分期及區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)的因素，揭示YKL-40、MMP-9、DLL4在預(yù)測(cè)腫瘤不良進(jìn)展中可能存在的協(xié)同關(guān)系。
　　 材料與方法：采用雙向性隊(duì)列研究設(shè)計(jì)。研究對(duì)象來自2005年1月至2009年12月期間長(zhǎng)

12、海醫(yī)院收治的病理確診為胰腺導(dǎo)管腺癌的連續(xù)初診病例。所有患者均經(jīng)手術(shù)治療，術(shù)前未行化療、放療。通過查閱病歷收集患者臨床及流行病學(xué)資料，其中包括人口學(xué)特征、個(gè)人史、既往病史、術(shù)前臨床表現(xiàn)、實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果、手術(shù)記錄、術(shù)后情況等；通過電話及門診復(fù)診獲取隨訪信息，包括總生存期、疾病無進(jìn)展生存期、術(shù)后放療及化療情況等。隨訪截止時(shí)間為2011年12月31日。采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)腫瘤標(biāo)本中YKL-40、MMP-9、DLL4的表達(dá)情況。所有數(shù)據(jù)均采用

13、統(tǒng)計(jì)學(xué)Kaplan-Meier及Cox回歸分析法，評(píng)價(jià)YKL-40、MMP-9、DLL4在癌組織中的表達(dá)變化對(duì)患者生存期的影響，并通過卡方檢驗(yàn)與多因素logistic回歸分析法，明確YKL-40表達(dá)水平與TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。
　　 結(jié)果：本研究共隨訪胰腺導(dǎo)管腺癌患者229例，年齡中位數(shù)為59歲(年齡范圍35-81歲)，其中男性占62.0％，隨訪時(shí)間中位數(shù)為11個(gè)月(時(shí)間范圍2-51個(gè)月)。YKL-40、MMP-9、DL

14、L4在229例胰腺導(dǎo)管腺癌組織中高表達(dá)者分別為156例(68.1％)、152例(66.4％)與139例(60.7％)。術(shù)后一個(gè)月內(nèi)死亡的患者未納入生存分析?；颊咧形豢偵鏁r(shí)間(95％可信區(qū)間)、無進(jìn)展生存時(shí)間(95％可信區(qū)間)分別為11(10.1-11.9)個(gè)月與6(5.2-6.8)個(gè)月。
　　 1、YKL-40表達(dá)與預(yù)后關(guān)系
　　 單因素分析結(jié)果顯示，總生存時(shí)間分別與YKL-40、DLL4、MMP-9、CA19-9、C

15、EA、手術(shù)切緣、腫瘤大小、TNM分期、腫瘤分化、術(shù)后放化療、性別潛在相關(guān)(P<0.20)；無進(jìn)展生存時(shí)間分別YKL-40、DLL4、MMP-9、CA19-9、CEA、手術(shù)切緣、腫瘤大小、TNM分期、術(shù)后放化療、術(shù)后并發(fā)癥、性別潛在相關(guān)(P<0.20)。
　　 多因素分析結(jié)果表明，YKL-40高表達(dá)、DLL4高表達(dá)、CEA升高、腫瘤長(zhǎng)徑大、高等級(jí)TNM分期、腫瘤分化程度低、術(shù)后未行放療均為總生存時(shí)間下降的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子(P<0.05

16、)；YKL-40高表達(dá)、CEA升高、高等級(jí)TNM分期、手術(shù)切緣陽性、術(shù)后未行放療、術(shù)后并發(fā)癥均為無進(jìn)展生存時(shí)間下降的的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子(P<0.01)。
　　 2、YKL-40表達(dá)與TNM分期
　　 單因素分析結(jié)果顯示，TNM分期分別與YKL-40表達(dá)、DLL4表達(dá)、MMP-9表達(dá)、腫瘤大小、腫瘤位置、生化指數(shù)、PLR、NLR潛在相關(guān)(P<0.20)。
　　 多因素分析結(jié)果顯示，腫瘤長(zhǎng)徑大、胰體尾部腫瘤均與高等級(jí)TN

17、M分期顯著相關(guān)(P<0.05)。
　　 3、YKL-40表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系
　　 單因素分析結(jié)果顯示，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分別與YKL-40表達(dá)、DLL4表達(dá)、MMP-9表達(dá)、CA19-9、腫瘤大小、腫瘤位置潛在相關(guān)(P<0.20)。
　　 多因素分析結(jié)果顯示，YKL-40高表達(dá)、胰頭部腫瘤均與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移明顯相關(guān)(P<0.01)。
　　 結(jié)論：胰腺導(dǎo)管腺癌組織高表達(dá)YKL-40與術(shù)后患者生存期下降、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著