大鼠門靜脈結(jié)扎后肝組織再生過程中HIF-1α表達(dá)的變化及意義.pdf

1、目的
　　肝癌是我國常見的惡性腫瘤之一，肝切除術(shù)是治療肝癌的最有效手段。術(shù)后剩余肝臟體積及儲備功能不足所致的急性肝功能衰竭是肝切除術(shù)后致命的并發(fā)癥，研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)正常肝臟術(shù)后剩余肝臟體積(futureliverremnant，F(xiàn)LR)/總肝體積（totallivervolume，TLV）小于25％，病理肝臟（慢性肝炎、肝硬化、近期行化療患者）的FLR/TLV小于40％，術(shù)后出現(xiàn)肝功能衰竭的風(fēng)險很大。如何有效增加肝切除術(shù)后剩余肝臟體積(

2、FLR)及儲備功能，提高肝臟腫瘤手術(shù)的安全性，一直是肝臟外科致力解決的問題。目前臨床上常用的方法是在肝切除前實施擬切除側(cè)肝臟的門靜脈結(jié)扎(portalveinligation，PVL)或門靜脈栓塞(portalveinembolization，PVE)，并且已經(jīng)取得了較好的療效。門靜脈結(jié)扎或門靜脈栓塞可導(dǎo)致缺血側(cè)肝臟的萎縮，而使對側(cè)肝臟再生肥大，但其具體機(jī)制尚不清楚。本研究旨在探討缺氧誘導(dǎo)因子1α(hypoxiainduciblefac

3、tor-1α，HIF-1α)在大鼠門靜脈結(jié)扎后肝組織再生過程中表達(dá)的改變及意義。
　　方法
　　90只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠隨機(jī)分成假手術(shù)組、肝動脈結(jié)扎組以及門靜脈結(jié)扎組。通過手術(shù)結(jié)扎大鼠肝動脈頭支、門靜脈頭支的方法來建立肝再生模型，分別觀察并測量各組術(shù)后12h、24h、48h、72h、168h結(jié)扎側(cè)和非結(jié)扎側(cè)肝臟體積和重量的改變。采用免疫組織化學(xué)和蛋白印跡(Westernblot)技術(shù)檢測非結(jié)扎側(cè)肝組

4、織中HIF-1α的表達(dá)，同時采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)技術(shù)檢測非結(jié)扎側(cè)肝組織中磷酸烯醇氏丙酮酸羧基酶(phosphoenolpyruvatecarboxykinase，PEPCK)的表達(dá)，所有實驗結(jié)果采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。
　　結(jié)果
　　1.大鼠70％門靜脈結(jié)扎后，結(jié)扎側(cè)肝葉呈進(jìn)行性萎縮變薄，非結(jié)扎側(cè)肝葉逐漸肥大再生。門靜脈結(jié)扎組非結(jié)扎側(cè)肝葉占全肝體積和重量百分比與假手術(shù)組和肝動脈結(jié)扎組比較術(shù)后1

5、2h顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，并且隨著術(shù)后時間延長，這種差異越來越明顯。
　　2.大鼠70％門靜脈結(jié)扎后非結(jié)扎側(cè)肝組織中HIF-1α的表達(dá)和PEPCK含量與假手術(shù)組和肝動脈結(jié)扎組比較術(shù)后顯著升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。其中HIF-1α于術(shù)后12h開始升高，24h達(dá)高峰，隨后24h-168h緩慢下降，但仍高于對照組;PEPCK于術(shù)后24h開始升高，48h達(dá)高峰，48h-168h緩慢下降，但仍高于對照組。

6、
　　3.HIF-1α的表達(dá)和PEPCK含量與門靜脈結(jié)扎后非結(jié)扎側(cè)肝臟體積和重量增加密切相關(guān)，門靜脈結(jié)扎后HIF-1α表達(dá)與PEPCK含量呈正相關(guān)，并且領(lǐng)先于PEPCK表達(dá)。
　　結(jié)論
　　大鼠門靜脈結(jié)扎后結(jié)扎側(cè)肝臟萎縮而非結(jié)扎側(cè)肝臟再生肥大。再生肝組織中HIF-1α表達(dá)顯著升高，并且領(lǐng)先于PEPCK的表達(dá)，HIF-1α可能通過調(diào)控關(guān)鍵酶PEPCK的表達(dá)來促進(jìn)肝細(xì)胞糖異生活性，保證了機(jī)體和肝細(xì)胞的能量供應(yīng)，從而在肝再生