生物轉(zhuǎn)化對羥基苯乙腈（PHN）制備對羥基苯乙酰胺（PHAD）的研究.pdf

1、對羥基苯乙酰胺是合成阿替諾爾的重要中間體。阿替諾爾是一種新型的β-腎上腺素能受體阻滯劑，對心臟的β受體有選擇的阻滯作用，臨床上具有顯著的長效降壓和減慢心率的效果。本文采用微生物催化技術(shù)，對生物轉(zhuǎn)化對羥基苯乙腈制備對羥基苯乙酰胺的微生物菌種篩選、培養(yǎng)和水合酶產(chǎn)酶條件、靜息細(xì)胞生物轉(zhuǎn)化工藝進(jìn)行了研究，為羥基苯乙酰胺的生物技術(shù)生產(chǎn)提供了一定的基礎(chǔ)。 本文篩選得到了7株有對羥基苯乙腈水解酶活力的菌株，對菌株E10a的形態(tài)、生理生化特性進(jìn)

2、行了鑒定，結(jié)合16srDNA全序列測定，確認(rèn)該菌株為赤紅球菌，命明RhodococcusruberE10a，Genebankaccessionno.DQ468352。對菌株RhodococcusruberE10a的培養(yǎng)和產(chǎn)酶條件進(jìn)行了考察，研究發(fā)現(xiàn)RhodococcusruberE10a菌株在發(fā)酵培養(yǎng)中加入各種誘導(dǎo)劑，其培養(yǎng)得到的菌體酶活并沒有顯著的提高；以酵母膏和麥芽糖分別作為氮源和碳源，有利于菌株的生長，其菌株的酶活力高；Co2+、

3、Zn2+對該腈水合酶有明顯的激活作用，而Cu2+存在下酶活力降低，同時(shí)通過試驗(yàn)證明該酶為Co型腈水合酶。 本論文在較優(yōu)的發(fā)酵條件下，制備收集E10a(Rhodococcusrubber)菌體，對其催化轉(zhuǎn)化工藝條件進(jìn)行了研究，結(jié)果表明，E10a靜息細(xì)胞水合PHN最適pH范圍6.0～7.0，最佳緩沖體系為NaH2PO4-Na2HPO4緩沖體系；底物濃度高于1.0％(w/v)時(shí)，對該酶起到抑制作用，當(dāng)?shù)孜餄舛冗_(dá)到2.0％時(shí)，E10a靜