人黑色素瘤抗原MAGe-A11對(duì)p53轉(zhuǎn)錄活性與穩(wěn)定性的影響.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師(或指導(dǎo)小組)的指導(dǎo)下，由本人獨(dú)立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果，其知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對(duì)本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開(kāi)和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名為單位河北醫(yī)科大學(xué)，試驗(yàn)材料、原始數(shù)據(jù)、申報(bào)的專利等知識(shí)產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則，承擔(dān)相應(yīng)法律責(zé)任。研究生虢躺藝導(dǎo)師虢燙級(jí)學(xué)河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指

2、導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)的研究成果，指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫(xiě)，文責(zé)自負(fù)。研究生虢絡(luò)、嘻長(zhǎng)UN’o一一新磷霉稠知B年’3月27日中文摘要人黑色素瘤抗原MAGEAll對(duì)p53轉(zhuǎn)錄活性與穩(wěn)定性的影響摘要目的：腫瘤抑制基因p53是迄今為止發(fā)現(xiàn)與人類腫瘤相關(guān)性最高的一種基因，研究表明50％以上的人類腫瘤都發(fā)生了p53突變。p53主要在細(xì)胞周期控制通路

3、如凋亡、細(xì)胞生長(zhǎng)阻滯以及衰老中起著重要作用。近來(lái)，一些研究顯示MAGEA蛋白參與了p53的調(diào)節(jié)以及細(xì)胞凋亡應(yīng)答。最近研究表明MAGEA2可以與p53結(jié)合，并募集轉(zhuǎn)錄抑制子組蛋白去乙酰化酶結(jié)合到p53DNA結(jié)合位點(diǎn)上，從而抑制p53的轉(zhuǎn)錄活性。有研究表明MAGEA3蛋白與KAPl結(jié)合后會(huì)抑制p53轉(zhuǎn)錄活性。而有研究提示，MAGEA4發(fā)揮了與該家族其他成員不同甚至是相反的生物學(xué)功能，它可以促進(jìn)p53的轉(zhuǎn)錄活性以及其功能。本課題旨在研究MAG

4、EA亞家族中MAGEA1l對(duì)p53轉(zhuǎn)錄活性及穩(wěn)定性的影響，旨在了解MAGEA11在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制。方法：1利用基因轉(zhuǎn)染、RTPCR和Westernblot實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)乳腺癌細(xì)胞系MDAMB231中p21WAFlmRNA和蛋白的表達(dá)情況。2利用基因轉(zhuǎn)染和熒光素酶報(bào)告基因分析實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)乳腺癌細(xì)胞系MDAMB231中p21黼1啟動(dòng)子介導(dǎo)的熒光素酶活性的表達(dá)情況，從而探討MAGEA11對(duì)p53轉(zhuǎn)錄活性的影響。3利用基因轉(zhuǎn)染和克隆形成

5、實(shí)驗(yàn)的方法來(lái)檢測(cè)在不同的體外轉(zhuǎn)染條件下乳腺癌MDAMB231細(xì)胞增殖的情況，進(jìn)一步分析MAGEA11對(duì)p53功能的作用。4利用半定量RTPCR和Westernblot方法分析人乳腺癌細(xì)胞系MDAMB231中轉(zhuǎn)染不同量的MAGEA11質(zhì)粒之后，p53在轉(zhuǎn)錄水平和翻譯水平上的表達(dá)，并進(jìn)一步分析MAGEA11對(duì)p53穩(wěn)定性影響的情況。5利用基因轉(zhuǎn)染、放線菌酮蛋白抑制分析和Westernblot方法檢測(cè)乳腺癌細(xì)胞系MDAMB231中MAGEA1