調(diào)控系統(tǒng)性紅斑狼瘡TOLL樣受體9-髓樣分化因子88信號(hào)通路的意義.pdf

1、目的：探討調(diào)控TOLL樣受體9（TLR9）/髓樣分化因子88（MyD88）信號(hào)通路在系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）的意義。
　　 方法：收集2008年12月至2009年3月我院住院SLE患者35例，均符合1997年美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)院（ACR）修訂的SLE分類標(biāo)準(zhǔn)，其中女性32例，男性3例，年齡15～70歲，平均（38±13）歲。15例正常對(duì)照為健康志愿者，其中女性10例，男性5例，年齡13～55歲，平均（37±8）歲。SLE患者均未用過羥

2、基氯喹（HCQ），除外感染。參考美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)院的SLE疾病活動(dòng)性指標(biāo)（SLE disease activity index，SLEDAI）對(duì)其疾病活動(dòng)進(jìn)行評(píng)分，20例患者SLEDAI積分≥10為疾病活動(dòng)，15例患者SLEDAI積分<10為疾病穩(wěn)定。分離SLE患者和正常對(duì)照外周血單核細(xì)胞（PBMC），并以1 μmol/L寡脫氧核苷酸（CpG ODN）2216刺激并培養(yǎng)24h，反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）檢測(cè)刺激前后TLR9、MyD

3、88 mRNA的水平變化，分別比較活動(dòng)組、穩(wěn)定組與正常對(duì)照組間TLR9、MyD88 mRNA表達(dá)水平的差異，分析活動(dòng)患者TLR9、MyD88 mRNA的表達(dá)水平與SLEDAI、補(bǔ)體等指標(biāo)的相關(guān)性；酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)上清液中IFN-α水平。10例SLE患者，以1 μmol/L CpG ODN2216刺激PBMC培養(yǎng)2h，再加入1 μmol/L HCQ培養(yǎng)16h，RT-PCR檢測(cè)HCQ刺激前后TLR9、MyD88 mRNA的水

4、平變化。
　　 結(jié)果：SLE患者PBMC中TLR9、MyD88 mRNA水平明顯高于正常對(duì)照（p<0.01）；活動(dòng)患者TLR9、MyD88 mRNA水平明顯高于穩(wěn)定患者（p<0.01）；活動(dòng)患者TLR9 mRNA水平與疾病活動(dòng)度評(píng)分（SLEDAI）正相關(guān)（rs=0.471,p<0.05），與C3、C4負(fù)相關(guān)（rs=-0.479，rs=-0.493,p<0.05）。CpG ODN2216刺激后SLE患者PBMC 中TLR9、MyD

5、88 mRNA水平明顯升高（p<0.01,p<0.05）；活動(dòng)患者培養(yǎng)上清中IFN-α的水平顯著升高（p<0.01）。CpG ODN2216 加HCQ組TLR9、MyD88 mRNA水平明顯低于無HCQ刺激組（p<0.001）。
　　 結(jié)論：SLE患者TLR9/MyD88信號(hào)通路明顯活化，CpG ODN2216通過上調(diào)TLR9、MyD88 mRNA的表達(dá)，誘導(dǎo)pDC分泌IFN-α增加，促進(jìn)疾病進(jìn)展。阻斷TLR9/MyD88通路活