單層培養(yǎng)與海藻酸鈉立體培養(yǎng)兔膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞力學(xué)特性比較的研究.pdf

1、目的:對(duì)海藻酸鈉立體培養(yǎng)與單層培養(yǎng)的兔膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞力學(xué)特性進(jìn)行量化分析，為軟骨組織工程治療軟骨損傷提供實(shí)驗(yàn)證據(jù)。
　　 方法:二月齡新西蘭白兔8只，雌雄不限。無菌條件下，分離雙膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞，隨機(jī)分為兩組，一組細(xì)胞以傳統(tǒng)方式單層培養(yǎng)，一組細(xì)胞以4×106/ml濃度與海藻酸鈉混合，通過硅膠盤模制成圓形柱狀細(xì)胞盤(25μ l/個(gè))，CaCl2溶液中凝膠化5分鐘，DMEM/F12無血清培養(yǎng)基加20％FBS(fatal blood s

2、olution)于6孔培養(yǎng)板中培養(yǎng)。于0、2、4周(1W、2W、4W)提取軟骨細(xì)胞。利用流式細(xì)胞儀測(cè)定單層培養(yǎng)與立體培養(yǎng)1W、2W及4W軟骨細(xì)胞的凋亡情況。兩種培養(yǎng)方式均采用半無限體模型(Half-space model)結(jié)合微管吸吮技術(shù)分析軟骨細(xì)胞的黏彈指數(shù)（瞬時(shí)模量E0、平衡模量E∞、表觀黏性μ）。
　　 結(jié)果:
　　 1、與單層培養(yǎng)的兔膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞相比，海藻酸鈉立體培養(yǎng)的軟骨細(xì)胞凋亡率和活細(xì)胞率無明顯差異(p＞0

3、.05);
　　 2、單層培養(yǎng)和海藻酸鈉立體培養(yǎng)軟骨細(xì)胞表現(xiàn)均為典型的黏彈性固體蠕變特征;
　　 3、與單層培養(yǎng)的兔膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞相比，海藻酸鈉立體培養(yǎng)的軟骨細(xì)胞黏彈性明顯較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.005)。
　　 4、海藻酸鈉立體培養(yǎng)4w時(shí)軟骨細(xì)胞黏彈性明顯低于1W，2W，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.005)。
　　 結(jié)論:
　　 1.流式細(xì)胞儀檢測(cè)，單層培養(yǎng)與立體培養(yǎng)的軟骨細(xì)胞凋亡率和活細(xì)