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文檔簡介
1、目的:通過分析慢性阻塞性肺病患者痰液菌群結(jié)構(gòu)改變情況，初步探討痰液菌群改變與COPD發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系，以期為臨床COPD的預(yù)防、診斷及治療過程中引入呼吸道菌群這一新的靶標(biāo)提供依據(jù)，為呼吸系統(tǒng)疾病的個(gè)體化治療開拓思路。
方法:按照痰液細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化操作程序收集臨床COPD患者痰液樣本，提取樣本中全部細(xì)菌總DNA，通過PCR技術(shù)，選用通用引物擴(kuò)增樣品中全部細(xì)菌16S rRNA基因。將擴(kuò)增產(chǎn)物通過變性梯度凝膠電泳(DGGE)分離
2、，獲得痰液細(xì)菌種屬結(jié)構(gòu)圖譜，對(duì)有意義的DNA條帶進(jìn)行切膠并克隆測(cè)序。利用Real-time PCR定量分析COPD患者痰液肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）、銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）和肺炎鏈球菌（Streptococcus pneumoniae）的變化。
結(jié)果: COPD組與健康人群組痰液細(xì)菌DGGE圖譜有明顯差異(P＜0.05)。Real-time PCR結(jié)果顯示:
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