歸芪聰志湯干預(yù)血管性癡呆模型大鼠及腦組織氧化損傷、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的研究.pdf

1、目的：通過觀察歸芪聰志湯對(duì)血管性癡呆（VD）模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力、海馬組織病理、腦皮質(zhì)氧化損傷相關(guān)酶以及海馬內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)志性分子的影響，探討該方治療血管性癡呆的藥效及其作用機(jī)理。
　　方法：雄性wistar大鼠80只（體重280±10g），按隨機(jī)數(shù)字表選10只大鼠作為假手術(shù)組，其余大鼠采用反復(fù)夾閉頸總動(dòng)脈加注射硝普鈉降壓聯(lián)合永久結(jié)扎單側(cè)頸總動(dòng)脈法制備VD模型；按隨機(jī)數(shù)字表分為模型組、陽性對(duì)照組（腦復(fù)康）、歸芪聰志湯高、中、低組。藥

2、物干預(yù)治療28天后進(jìn)行Morris水迷宮行為學(xué)檢測(cè)，通過定位航行及空間搜索實(shí)驗(yàn)檢測(cè)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力；處死大鼠，取各組大鼠腦皮質(zhì)及海馬組織進(jìn)行指標(biāo)檢測(cè)， HE染色觀察各組大鼠海馬組織病理改變；生物化學(xué)法檢測(cè)各組大鼠腦皮質(zhì)勻漿液氧化損傷相關(guān)酶SOD、GSH-Px、MDA含量；RT-qPCR和Western blot分別檢測(cè)各組大鼠之間內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)分子HSP70、HSP27、GRP78、GRP94、CHOP、XBP1mRNA和蛋白的表達(dá)量變

3、化。
　?。?）Morris水迷宮行為學(xué)檢測(cè)：與假手術(shù)組相比，模型組大鼠逃逸潛伏期明顯增長(zhǎng)，穿越平臺(tái)次數(shù)明顯減少（P﹤0.05）；與模型組相比，各藥物干預(yù)組大鼠逃逸潛伏期顯著縮短，穿越平臺(tái)次數(shù)顯著增加（P﹤0.05）；其中歸芪聰志湯中劑量組明顯優(yōu)于陽性對(duì)照組（P﹤0.05）。
　?。?）海馬組織病理觀察：與假手術(shù)組相比，模型組海馬組織神經(jīng)細(xì)胞損傷加重；與模型組相比，各藥物干預(yù)組海馬神經(jīng)細(xì)胞損傷程度均減輕；與陽性對(duì)照組相比，其

4、中歸芪聰志湯中、高劑量組海馬組織神經(jīng)細(xì)胞損傷程度明顯輕于陽性對(duì)照組。
　?。?）氧化損傷相關(guān)酶檢測(cè)：與假手術(shù)組相比，模型組大鼠SOD和 GSH-Px明顯降低，MDA明顯升高（P﹤0.05）；與模型組相比，各藥物干預(yù)組 SOD和 GSH-Px顯著升高，MDA顯著降低（P﹤0.05）；其中歸芪聰志湯中劑量組明顯優(yōu)于陽性對(duì)照組（P﹤0.05）。
　?。?）內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)分子 mRNA檢測(cè)：與假手術(shù)組相比，模型組大鼠海馬組織HSP7

5、0、HSP27、GRP78、GRP94、CHOP、XBP1基因表達(dá)顯著上調(diào)（P＜0.05）；與模型組相比，除歸芪聰志湯低劑量組，各藥物干預(yù)組HSP70、HSP27、GRP78、GRP94、CHOP、XBP1基因表達(dá)顯著下調(diào)（P＜0.05)；與陽性對(duì)照組相比，HSP27中劑量組顯著下調(diào)（P＜0.05)，歸芪聰志湯各劑量組的其它五個(gè)基因無顯著變化。
　?。?）內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)分子蛋白檢測(cè)：與假手術(shù)組相比，模型組大鼠海馬組織GRP78、G

6、RP94、CHOP、XBP1蛋白表達(dá)顯著上調(diào)（P＜0.05）；與模型組相比，除歸芪聰志湯低劑量組，各藥物干預(yù)組四個(gè)蛋白表達(dá)顯著下調(diào)（P＜0.05）；與陽性對(duì)照組相比，歸芪聰志湯中劑量組四個(gè)蛋白顯著下調(diào)（P＜0.05）。
　　結(jié)論：反復(fù)夾閉頸總動(dòng)脈加注射硝普鈉降壓聯(lián)合永久性結(jié)扎單側(cè)頸總動(dòng)脈法可以較好的復(fù)制VD大鼠模型，模型可靠。歸芪聰志湯能夠顯著改善VD模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力，減輕海馬神經(jīng)細(xì)胞損傷，且以中劑量效果最為顯著。其機(jī)理與降