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文檔簡介
1、目的:本研究旨在通過動物實(shí)驗(yàn)觀察中藥防哮飲早期干預(yù)治療對哮喘小鼠血清白細(xì)胞介素-10(IL-10)、支氣管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸粒性細(xì)胞(EOS)百分比的影響,擬從免疫學(xué)角度、細(xì)胞因子水平探討中藥防哮飲早期干預(yù)治療哮喘的作用機(jī)制,為臨床用藥提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
實(shí)驗(yàn)方法:將60只清潔型昆明小鼠隨機(jī)分為6組(每組10只):正常對照組(A組)、哮喘模型組(B組)、中藥防哮飲小劑量組(C組)(10g/kg〃d)、中藥防哮飲中劑
2、量組(D組)(30g/kg〃d)、中藥防哮飲大劑量組(E組)(50g/kg〃d)、布地奈德組(F組)(BUD組)。用藥劑量分別按動物體表面積換算。B、C、D、E、F組實(shí)驗(yàn)小鼠于第1天和第14天給予10%卵白蛋白溶液(10%OVA)0.1ml及佐劑10%氫氧化鋁溶液0.2ml腹腔注射致敏,從第21天開始,將B、C、D、E、F組小鼠依次序放于密閉容器(20cm×30cm×40cm)內(nèi)使其霧化吸入5%OVA溶液30min/次,1次/天,共7天
3、;實(shí)驗(yàn)小鼠以出現(xiàn)喘息、抓鼻、煩燥不安、俯臥不動、呼吸急促、腹肌痙攣、倚籠而立、大小便失禁等表現(xiàn)為陽性反應(yīng),說明實(shí)驗(yàn)小鼠哮喘模型造模成功。A組實(shí)驗(yàn)小鼠以等量的生理鹽水代替OVA以同樣的方法腹腔注射及霧化吸入;中藥防哮飲組從第1天起,將中藥防哮飲按小劑量(含生藥0.5g/ml)、防哮飲中劑量(含生藥1.5g/ml)、防哮飲大劑量(含生藥2.5g/ml)以灌胃的方式給藥,每天1次,每次0.4ml,共27天;BUD組從第1天起,每次霧化吸入0.
4、5mg/ml的BUD溶液2ml,2次/天,每次25min,共27天。A組和B組則以等量生理鹽水代替中藥予小鼠灌胃。各組小鼠在最后一次激發(fā)后24 h(第28天)摘眼球取血1ml,離心后取血清,采用雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測小鼠血清IL-10的含量;然后取小鼠支氣管肺泡灌洗液,離心后涂片,瑞吉染液染色,計(jì)數(shù)200個細(xì)胞,計(jì)算其中EOS的個數(shù),并獲取EOS的百分比。用統(tǒng)計(jì)軟件PEMS3.1軟件包對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
5、 結(jié)果:正常對照組﹑防哮飲小劑量組與喘模型組比較,小鼠血清IL-10水平明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);防哮飲大劑量組、防哮飲中劑量組及BUD組與哮喘模型組比較,小鼠血清IL-10水平顯著升高,差異具有非常顯著性意義(P<0.01);防哮飲大劑量組、防哮飲中劑量組及防哮飲小劑量組與BUD組相比,小鼠血清IL-10水平無顯著性差異(P>0.05)。
正常對照組、防哮飲大劑量組、防哮飲中劑量組、防哮飲小劑量組、布地奈德
6、組與哮喘模型組比較,BALF中EOS的百分比明顯偏低,差異具有非常顯著性意義(P<0.01);BUD組與防哮飲大劑量組、防哮飲中劑量組、防哮飲小劑量組比較,BALF中 EOS的百分比無顯著性差異(P>0.05)。
結(jié)論:中藥防哮飲早期干預(yù)治療能夠顯著升高哮喘小鼠血清IL-10的水平、降低BALF中EOS的百分比,其療效與布地奈德相當(dāng)。提示中藥防哮飲早期干預(yù)對哮喘具有良好的防治作用,是治療哮喘的一種有效的藥物,值得進(jìn)一步深入地系
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