CpGDNA干預(yù)哮喘小鼠IL-17水平變化.pdf

1、目的： （1）建立急性支氣管哮喘小鼠模型，使用CpGODN干預(yù)，觀察小鼠血清、肺泡灌洗液的IL-17（Interleukin-17）水平的變化，探討其免疫調(diào)節(jié)的可能機(jī)制。 （2）觀察糖皮質(zhì)激素對(duì)哮喘小鼠體內(nèi)IL-17的影響，探討IL-17與哮喘的相關(guān)性。 方法： 40只清潔級(jí)雄性Balb/c小鼠隨機(jī)分為4組，正常對(duì)照組（A組）、哮喘組（B組）、地塞米松治療組（C組）、CpGODN治療組（D組），每組10只

2、。B組以卵清白蛋白（Ovalbumin，OVA）致敏和激發(fā)建立小鼠急性哮喘模型[1]。A組致敏和激發(fā)均以生理鹽水替代OVA，C組和D組均以O(shè)VA致敏，但激發(fā)前一天和每次激發(fā)前1h分別腹腔注射（intraperitoneal injection，i.P）DXM0.5mg/kg和CpGODN50μg/只[2]。各實(shí)驗(yàn)組末次激發(fā)后24小時(shí)后收集支氣管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）計(jì)數(shù)細(xì)胞總數(shù)并

3、分類；取肺組織作病理檢測(cè)在光鏡、電鏡下觀察小鼠氣道炎癥情況；ELISA法檢測(cè)BALF及血清中IL-17的表達(dá)水平。 結(jié)果： （1）BALF中炎癥細(xì)胞情況：各組BALF中細(xì)胞總數(shù)、EOS絕對(duì)值計(jì)數(shù)、EOS細(xì)胞總數(shù)的百分比（EOS%）的比較，與A組相比，B組BALF中細(xì)胞總數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞（EOS）絕對(duì)值以及EOS占細(xì)胞總數(shù)的百分比（EOS%）顯著增加（P<0.01），C、D兩組無顯著變化；與B組相比，C組、D組上述各指標(biāo)顯

4、著減少（P<0.01）：與C組相比，D組上述各指標(biāo)無顯著變化。 （2）肺組織病理改變：A組支氣管黏膜上皮、黏膜肌層完好，支氣管周圍無明顯炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，管腔內(nèi)無明顯分泌物貯留；B組支氣管收縮，管腔狹窄，支氣管及血管周圍有較多炎性細(xì)胞浸潤(rùn)（以EOS、淋巴細(xì)胞和中性粒細(xì)胞為主），黏液分泌明顯增加。黏膜上皮壞死脫落，基底膜露出，支氣管內(nèi)分泌物貯留，并有基底膜增厚和平滑肌肥大增生等表現(xiàn)；C組和D組支氣管和血管周圍可見少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，黏液

5、分泌明顯減少，支氣管平滑肌無明顯增厚。 （3）肺組織超微結(jié)構(gòu)：電鏡下A組顯示正常肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞，支氣管纖毛細(xì)胞纖毛排列整齊；B組顯示肺泡隔明顯增厚，基底膜增厚，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，可見吞噬小體，肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞腫脹，脫落于肺泡腔內(nèi)，出現(xiàn)板層體空泡化和部分排空現(xiàn)象，支氣管纖毛細(xì)胞纖毛排列稀疏或斷裂；C組和D組肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞板層小體及線粒體空泡變性現(xiàn)象不明顯，支氣管上皮細(xì)胞纖毛排列尚整齊。 （4）ELISA法檢測(cè)BALF及血清

6、中IL-17的表達(dá)水平： BALF中IL-17濃度比較：與A組IL-17濃度（53.02±3.31pg/ml）相比，B組中IL-17濃度（57.50±5.59pg/ml）明顯升高（P<0.05），兩者有顯著性差異；與B組（57.50±5.59pg/ml）相比，C組、D組IL-17濃度（51.37±4.11pg/ml，51.37±3.24pg/ml）明顯降低（P<0.01），有顯著性差異。 血清中IL-17濃度比較：與A

7、組IL-17濃度（217.52±36.30pg/ml）相比，B組中IL-17濃度（255.08±49.46pg/ml）明顯升高（P<0.05），兩者有顯著性差異；與B組（255.08±49.46pg/ml）相比，C組、D組IL-17濃度（207.20±20.08pg/ml，218.35±44.08pg/ml）明顯降低（P<0.01），有顯著性差異。 結(jié)論： （1）OVA急性支氣管哮喘小鼠血清及BALF中IL-17水平明顯