肝癌組織中螺桿菌感染及相關(guān)基因檢測(cè)研究.pdf

1、目的:通過(guò)細(xì)菌培養(yǎng)、電鏡技術(shù)、PCR擴(kuò)增螺桿菌屬16SrRNA基因和相關(guān)功能基因等分子生物學(xué)技術(shù)，探討螺桿菌感染與人類原發(fā)性肝癌(HCC)的相關(guān)性。 方法:1、選取38例HCC患者的肝癌組織為實(shí)驗(yàn)組，28例其他肝病患者肝組織和29例胃癌患者胃癌組織、18例結(jié)直腸癌、18例子宮肌瘤作對(duì)照組。2、應(yīng)用哥倫比亞培養(yǎng)基分離培養(yǎng)癌組織中的螺桿菌，并對(duì)培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行 G染色、投射電鏡(TEM)觀察和尿素酶檢測(cè)鑒定，掃描電鏡(SEM)觀察癌

2、組織中細(xì)菌形態(tài)、位置。3、采用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測(cè)螺桿菌屬16SrRNA基因，用螺桿菌屬特異探針、Hp、Hh和Hf種特異性J6SrRNA-cDNA探針對(duì)各組16SrRNA的擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)Southem雜交確認(rèn)，并進(jìn)行測(cè)序及同源性比較。4、檢測(cè)Hp的特異基因26- kDa及相關(guān)功能基因cagA、vacA、rps4、glmM。通過(guò)以上方法綜合評(píng)價(jià)螺桿菌感染與HCC的相關(guān)性。 結(jié)論:1、HCC患者肝組織中存在螺桿菌感染且感染率較高。