高糖和高胰島素對(duì)MCF-7-ADR細(xì)胞P-糖蛋白表達(dá)和功能的影響.pdf

1、目的：
　　檢測(cè)MCF-7/ADR細(xì)胞中P-糖蛋白存在的情況，分析高糖、高胰島素對(duì)P-糖蛋白表達(dá)和功能的影響，對(duì)糖尿病乳腺癌患者化療耐藥情況進(jìn)行初步探討。
　　方法：
　　用不同糖濃度和不同胰島素濃度的全細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)MCF-7/ADR細(xì)胞，分別采用Real-time PCR法檢測(cè)細(xì)胞中Mdr1 mRNA的表達(dá)量和Western Blot法檢測(cè)細(xì)胞中P-糖蛋白含量，以及羅丹明123熒光實(shí)驗(yàn)測(cè)定目的蛋白的功能變化。同時(shí)，

2、用熒光顯微鏡檢測(cè)以上實(shí)驗(yàn)的葡萄糖濃度是否能夠可以引起細(xì)胞凋亡，以排除凋亡對(duì)目的蛋白表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：
　　(1)Mdr1 mRNA的相對(duì)表達(dá)量隨葡萄糖濃度的增加，在11.1 mmol/l明顯增高，此后又迅速降低，11.1～27.8mmol/l葡萄糖濃度組與5.6mmol/l葡萄糖濃度組比較，Mdr1的表達(dá)量均存在顯著差異；Mdr1 mRNA的表達(dá)量隨果糖濃度的增加，在5.6～16.7mmol/l果糖濃度組之間逐漸降低，

3、在22.2、27.8mmol/l果糖濃度組又逐漸增高，11.1～27.8mmol/l果糖濃度組的表達(dá)量與5.6mmol/l果糖濃度組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；Mdr1表達(dá)量隨細(xì)胞培養(yǎng)基中胰島素濃度的增加，逐漸降低，0.005～0.01μmol/l胰島素濃度組與不含胰島素組比較，兩組Mdr1 mRNA的表達(dá)量存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　(2)P-糖蛋白表達(dá)量隨葡萄糖濃度的增高而變化，先增高(11.1mmol/l)，后逐漸減低(16.7～2

4、7.8mmol/l)。5.6mmol/l葡萄糖濃度組P-糖蛋白表達(dá)量明顯高于16.7～27.8mmol/l葡萄糖濃度組(P<0.001)；P-糖蛋白表達(dá)量隨胰島素濃度的增高，逐漸減低。且0，0.001μmol/l胰島素濃度組的P-糖蛋白表達(dá)水平明顯高于0.005和0.01μmol/l胰島素濃度組(P<0.001)。
　　(3)P-糖蛋白功能隨葡萄糖和胰島素濃度的增高，逐漸降低，降低程度明顯，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)論：