高糖環(huán)境對大鼠胰島功能和胰島細胞凋亡的相關性研究.pdf

1、目的:研究高濃度葡萄糖對體外培養(yǎng)胰島功能和胰島細胞凋亡的影響及其機制。 方法: 1、將分離的SD大鼠胰島按培養(yǎng)液中葡萄糖的濃度和培養(yǎng)時間的不同分為六組：NG1組(葡萄糖5.6mmol/L培養(yǎng)1天)、NG2組(葡萄糖5.6mmol/L培養(yǎng)3天)、NG3組(葡萄糖5.6mmol/L培養(yǎng)5天)；HG1組(葡萄糖25.6mmol/L培養(yǎng)1天)、HG2組(葡萄糖25.6mmol/L培養(yǎng)3天)、HG3組(葡萄糖25.6mmol/L培養(yǎng)5天)

2、。2、采用雙硫腙染色法和免疫組織化學技術鑒定胰島細胞團； 3、體外胰島素刺激釋放(GSIS)實驗，放免法檢測胰島素水平；TUNEL法檢測胰島的凋亡情況；4、逆轉錄-熒光定量-多聚酶鏈反應 (RT-FQ-PCR)技術檢測胰島中胰島素、PDX-1、Caspase-3、BAX等基因mRNA的定量表達。 結果: 1、HG組各組胰島素分泌量均低于NG組各組(P<0.05)；各NG組的GSIS實驗，其胰島素分泌量無明顯差異(P>0.05)；

3、HG1組的胰島素分泌量高于HG2、3組(P<0.05)。2、HG1組胰島素基因表達高于其余各組(P<0.05)，但HG2、3組胰島素基因表達分別低于NG2、3組(P<0.05)；各HG1組、2組和3組PDX-1表達分別高于各NG1組、2組和3組 (P<0.05)，但HG3組與HG1、2組比較PDX-1表達下降 (P<0.05)。3、HG1組、2組和3組胰島細胞凋亡率均明顯高于各對應的NG1組、2組和3組(P<0.05)。4、RT-FQ－

4、PCR顯示HG1組、2組和3組與各對應的NG1組、2組和3組相比，Caspase-3、BAX基NmRNA的表達增加(P<0.05)，且HG3組高于HG2組，HG2組高于HG1組(P<0.05)；NG3組與NG1、2N．相比Caspase-3和BAX基因mRNA的定量表達增加(P<0.05)。 結論:1、本研究在建立SD大鼠胰島離體培養(yǎng)體系的基礎上，基本了解離體胰島在體外培養(yǎng)條件下的生長情況。2、高糖環(huán)境抑制葡萄糖刺激胰島素分泌功