茶樹菇降血壓活性肽的提取分離研究.pdf

1、高血壓是一種以動脈收縮壓或舒張壓升高為特征的臨床綜合癥，它常伴有心臟、血管、腦和腎臟等器管疾病。食品蛋白質(zhì)中含有具有降血壓作用的活性肽(降血壓肽)，它可以通過抑制血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)的活性來達到降血壓的作用，因此也稱為血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制肽(ACEI)。 以茶樹菇為原料，采用溶劑提取法提取茶樹菇中的降血壓活性肽，以蛋白質(zhì)提取率㈣和提取液對ACE活性抑制率(IP)為指標，考察了以水和50％乙醇為提取溶劑的提取效果。實驗結(jié)果顯

2、示茶樹菇水提液的提取率為85．78％，抑制率為48.43％，50％乙醇提取液的提取率為41.48％，抑制率為49.16％，綜合考慮選擇水作為提取溶劑，并優(yōu)化了水提法的提取工藝，確定了提取的適宜工藝條件為：提取溫度30℃，最適pH為8，提取時間9h，此時蛋白質(zhì)提取率(D)可達到88.3％，對ACE的抑制率(IP)為49.3％。 使用活性炭對提取液脫色，采用單因素實驗法，考察了活性炭用量、脫色溫度、溶液pH值、脫色時間對脫色率(Dc

3、)和活性損失率(Lp)的影響，實驗結(jié)果表明，在加入0.5％活性碳、脫色溫度40℃、溶液pH3.5的條件下脫色40min，脫色效果較好，脫色率(Dc)可達到78.86％，活性損失率(Lp)為15.68％，對ACE的抑制率(IP)為41.57％。 實驗使用10kDa超濾膜對脫色液進行超濾富集活性成分，收集濾液，進行層析分離，考察了Sephadex G-25凝膠、Sephadex G-15凝膠的分離效果。選用Sephadex G-15

4、凝膠為層析材料，以水為洗脫溶劑，洗脫速度為1.0mL·min-1，上樣量為3mL時，可收集到3種組分，活性肽回收率(RP)可達91.1％，其中洗脫Ⅲ峰有較高的ACE抑制效果，抑制率(IP)為46.4％，Ⅲ峰活性肽回收率(Rp)為25.6％。 選用Ⅲ洗脫峰為原料，采用RP-HPLC反相制備色譜分離，可以得到4種組分，經(jīng)活性檢測，ACE抑制活性最強組分位于Ⅲ-d(1)組分，純度可達95％以上，其IC50為0.0109 mg·mL-1