纖維素酶高產(chǎn)菌株的選育及酶的分離純化研究.pdf

1、西南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文纖維素酶高產(chǎn)菌株的選育及酶的分離純化研究姓名：劉春芬申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：食品科學(xué)指導(dǎo)教師：賀稚非20050501西南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士論文摘妥每管收集50ml，10min收集一管，發(fā)現(xiàn)收集的150管中第99管活性最高，在第一蛋白峰處沒(méi)有目的酶活性，為雜蛋白。在NaCl濃度為0305～0416mol／L時(shí)，即可將纖維素酶洗脫下來(lái)。5采用SephadexO75分子篩凝膠過(guò)濾純化纖維素酶。流速為18mL／h，每收集管50

2、ml，10min收集一次。層析出現(xiàn)一個(gè)小的蛋白洗脫峰和一個(gè)大的蛋白峰。經(jīng)活性檢測(cè)，大的蛋白洗脫峰沒(méi)有酶活性，小峰出現(xiàn)酶活性。6對(duì)各步純化后的酶蛋白sDsPAGE凝膠電泳，分離膠濃度12％，濃縮膠濃度4％。銀染鑒定純度。結(jié)果表明，原發(fā)酵液含有大量的不同分子量的蛋白，經(jīng)過(guò)鹽析透析后酶液雜蛋白明顯減少，但仍然含有多種蛋白。經(jīng)過(guò)離子交換層析后，在膠的下端有三條較弱的雜蛋白帶，其它雜蛋白已完全去除。再經(jīng)過(guò)凝膠過(guò)濾層析，纖維素酶進(jìn)一步得到純化，SD