PHA生產(chǎn)菌株的選育及其混合發(fā)酵條件的優(yōu)化.pdf

1、聚羥基脂肪酸酯(Polyhydroxyalkanoates,PHA)是由多種細菌合成的可完全生物降解的胞內(nèi)聚酯,其研究對于環(huán)境保護以及資源的可持續(xù)利用具有重要的意義。本論文從自然界篩選獲得2株具有PHA合成能力的菌株,利用響應面分析法優(yōu)化了混菌發(fā)酵工藝,并對發(fā)酵產(chǎn)物的物化性能進行了表征和分析,結(jié)果如下:
　　(1)從新疆12個采樣點中篩選獲得了2株PHA積累能力較高的菌株,通過形態(tài)、生理生化和16S rDNA等方法對其進行鑒定,分

2、別命名為 Burkholderia cepacia WN-H41和Bacillus sp.1175,并且利用平板對峙法證實兩種細菌可共生。
　　(2)以2種目的菌株為研究對象,對PHA混合發(fā)酵過程進行了初步優(yōu)化。通過單因素實驗考察了種齡、接種比例、發(fā)酵周期、碳源、氮源等條件對PHA發(fā)酵的影響;Plackett-burman設計實驗結(jié)果顯示蛋白胨、MgSO4·7H2O和可溶性淀粉的濃度對PHA產(chǎn)量貢獻較大。Box-Benhnken

3、Design實驗結(jié)果表明在蛋白胨17 g/L,MgSO4·7H2O0.4 g/L,可溶性淀粉39 g/L的優(yōu)化條件下實際PHA產(chǎn)量為7.668 g/L,與理論值7.780 g/L相近,較最佳單因素條件產(chǎn)量提高了2.15倍。
　　(3)對單菌和混合發(fā)酵產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)、分子量、熱性能和拉伸性能進行了分析比較,結(jié)果表明:3種發(fā)酵產(chǎn)物均為聚羥基丁酸(PHB),相比于單菌發(fā)酵,混合發(fā)酵合成PHB的平均分子量明顯增大(Mn=11.2×104),分