大腸桿菌中提高番茄紅素產(chǎn)量的代謝途徑修飾.pdf

1、番茄紅素是類胡蘿卜素的一種，具有極強(qiáng)的抗氧化能力和消除自由基的能力，其在抗衰老和防癌方面的功能受到人們?cè)絹?lái)越多的關(guān)注。使用番茄為原料制備番茄紅素的方法成本較高且提取率不高，不適用于工業(yè)生產(chǎn)，因而人們主要應(yīng)用微生物發(fā)酵的方法制備番茄紅素。與天然產(chǎn)番茄紅素的微生物相比，應(yīng)用基因工程構(gòu)建的產(chǎn)番茄紅素大腸桿菌具有發(fā)酵時(shí)間短、安全、經(jīng)濟(jì)等優(yōu)點(diǎn)，是工業(yè)化生產(chǎn)的主要備選菌種。
　　 在本研究中，主要應(yīng)用代謝工程和定向進(jìn)化的技術(shù)方法對(duì)產(chǎn)番茄紅素

2、大腸桿菌的代謝途徑進(jìn)行了修飾，目的是獲得提高番茄紅素產(chǎn)量的大腸桿菌工程菌。以代謝途徑關(guān)鍵酶基因dxs和細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子rpoS為對(duì)象，進(jìn)行了基因組合表達(dá)、啟動(dòng)子替換與定向突變，均提高了番茄紅素的產(chǎn)量。然而對(duì)結(jié)果進(jìn)行整合與篩選后，番茄紅素產(chǎn)量并未繼續(xù)提高。得出以下結(jié)論:
　　 首先，關(guān)鍵酶基因dxs和轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子rpoS的過量表達(dá)能夠定向提高代謝流，從而提高番茄紅素產(chǎn)量73.6％和133.6％。
　　 第二，基因組的基