中藥復(fù)方0326的研究.pdf

1、復(fù)方0326是我室自行研制的中藥復(fù)方，經(jīng)初步藥理學(xué)試驗(yàn)具有一定抗艾滋病、抗腫瘤活性，并能提高機(jī)體免疫力。本課題選用本復(fù)方為研究對(duì)象，以抗艾滋病效果為評(píng)價(jià)指標(biāo)，以HPLC指紋圖譜分析方法為主，對(duì)復(fù)方顆粒劑進(jìn)行質(zhì)量控制研究。本復(fù)方中藥由當(dāng)歸、蛇床子、白及、黃連四味藥材組成，主要指標(biāo)性成分為阿魏酸、蛇床子素、黃連素、多糖等。主要研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下： 提取方法：固定提取條件，先將四味中藥分別提取，計(jì)算提取率，解決中藥復(fù)方在提取過(guò)程中提取

2、率波動(dòng)引起的含量變化導(dǎo)致藥效不穩(wěn)定的問(wèn)題。當(dāng)歸、黃連、蛇床子三味中藥分別采用60％乙醇回流提取，再用水煮提，白及采用滲漉法提取。 有效成分HPLC指紋圖譜及含量測(cè)定：根據(jù)提取率計(jì)算各藥材成分用量，制成復(fù)方顆粒劑，可更有效地控制本制劑的內(nèi)在質(zhì)量。建立各有效成分含量測(cè)定方法，并應(yīng)用HPLC方法，建立了復(fù)方抗艾顆粒劑的HPLC指紋圖譜分析方法，復(fù)方指標(biāo)性成分進(jìn)行定性定量控制，方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，為其質(zhì)量控制提供了更全面的信息。鑒

3、于本復(fù)方由脂溶性成分和水溶性成份組成，水溶性有效成分以多糖為主，因此水溶性成分采用硫酸苯酚法，對(duì)其多糖成分進(jìn)行定性定量控制。經(jīng)測(cè)定，水溶性成分中，多糖含量為25.7％。脂溶性成分用70％甲醇溶解，采用HPLC指紋圖譜分析方法對(duì)復(fù)方進(jìn)行定性定量控制。經(jīng)過(guò)對(duì)三藥材組分紫外掃描，確證在315nm均有較大吸收，確定HPLC檢測(cè)波長(zhǎng)為315nm。并經(jīng)過(guò)多次探索，確定洗脫系統(tǒng)為乙腈-0.1％三乙胺和25mmol/LKH<,2>PO<,4>水溶液(磷

4、酸調(diào)PH到3)。75min內(nèi)可使全部色譜峰流出，且大部分得到基線(xiàn)分離。梯度條件為0～20min乙腈體積分?jǐn)?shù)由10增至25；25～35min乙腈體積分?jǐn)?shù)由35增至45；60～75min乙腈體積分?jǐn)?shù)由45增至75。檢測(cè)波長(zhǎng)315nm；柱溫25℃；體積流量1.0 ml/min；進(jìn)樣體積為20μl。根據(jù)峰面積計(jì)算指標(biāo)性成分阿魏酸、蛇床子素、黃連素含量，阿魏酸含量均數(shù)為0.5795，RSD值為0.84％，蛇床子素含量均數(shù)為26.97，RSD值為0

5、.60％，黃連素含量均數(shù)為25.738，RSD值為0.29％。三種成分含量RSD值均小于5％，可見(jiàn)批內(nèi)檢測(cè)精密度較高，檢測(cè)方法重復(fù)性較好。生物活性研究部分進(jìn)行體外抗艾滋病病毒活性研究、體外抑菌實(shí)驗(yàn)研究、人體腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒試驗(yàn)以及體內(nèi)抗腫瘤活性研究等研究?jī)?nèi)容，驗(yàn)證了復(fù)方0326對(duì)HIV-1逆轉(zhuǎn)錄酶有一定的抑制作用。進(jìn)一步藥理研究表明復(fù)方0326對(duì)真菌有一定的抑菌能力；抗腫瘤實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示低劑量組具有明顯的抑制小鼠移植性腫瘤H22的作用。對(duì)