抗寄生蟲中藥復(fù)方C研究.pdf

1、目的：
　　篩選出中藥抗寄生蟲有效方（復(fù)方C），研制出復(fù)方C提取物，為抗寄生蟲中藥新藥的研究開發(fā)提供參考。
　　方法：
　　1.建立以動(dòng)物Ⅰ為寄主、寄生蟲Y的動(dòng)物模型，利用該模型，建立藥效學(xué)評(píng)價(jià)方法，對(duì)19種中藥方提取物進(jìn)行殺蟲活性篩選。
　　2.利用紫外分光光度法建立復(fù)方C的化學(xué)評(píng)價(jià)方法，對(duì)復(fù)方C提取方法、溶媒選擇、粉碎度、溶媒用量、提取時(shí)間和提取次數(shù)這些單因素進(jìn)行考察，優(yōu)選出各單因素水平，采用4因素3水平的L

2、9（34）正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)優(yōu)選出復(fù)方C最佳提取工藝，結(jié)合生產(chǎn)需求等因素綜合評(píng)價(jià)優(yōu)選出復(fù)方C提取物的制備工藝。
　　3.根據(jù)不同濃度的復(fù)方C提取物對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物的進(jìn)行安全性試驗(yàn)，把試驗(yàn)動(dòng)物的平均死亡率轉(zhuǎn)換成概率單位，采用Bliss法計(jì)算分析試驗(yàn)動(dòng)物24、48、96 h的的半致死濃度LC50，采用 spss13.0軟件中的Probit概率單位分析法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。
　　4.以二氯甲烷-甲醇-甲酸（93:9:4）為展開劑，對(duì)照品溶液點(diǎn)樣量為1μ

3、l，供試品溶液點(diǎn)樣量5μl，顯色劑：磷鉬酸（10％），采用薄層色譜法對(duì)復(fù)方C提取物進(jìn)行定性鑒別。
　　5.采用以下色譜條件：流動(dòng)相：甲醇-0.4％磷酸（27:73），色譜柱：Agilent Eclipse Plus C18（4.6×250，5μm），柱溫：30℃，檢測(cè)波長(zhǎng)：323nm，檢測(cè)器：DAD，分析時(shí)間：25min，流速：1ml/min，高效液相色譜法對(duì)復(fù)方C提取物進(jìn)行含量測(cè)定。
　　結(jié)果：
　　篩選出中藥復(fù)方C

4、抗動(dòng)物Ⅰ寄生蟲Y的效果最好。復(fù)方C提取物的紫外最大吸收波長(zhǎng)是323nm，線性、重現(xiàn)性、穩(wěn)定性、加樣回收率方法學(xué)考察均小于2％。復(fù)方C提取物制備工藝為：粉碎過(guò)60目篩網(wǎng)，選用溶媒Ⅳ，回流法提取3次，每次30min，提取溶媒用量分別為8倍、8倍和6倍。復(fù)方C提取物劑量為20mg/L時(shí)，對(duì)寄生蟲Y的殺蟲率即可達(dá)到100％，96h時(shí)試驗(yàn)動(dòng)物致死濃度為
　　1566.3mg/L。復(fù)方C提取物薄層鑒定樣品、對(duì)照品、對(duì)照藥材的指示斑點(diǎn)一致，展開