PEG化脂質(zhì)納米粒促進非諾貝特口服吸收的研究.pdf

1、脂質(zhì)納米粒(Lipid nanoparticles)是在脂質(zhì)體、微乳等納米載體基礎(chǔ)上逐漸發(fā)展起來的一種新型藥物遞送載體。因其載藥量高、載體材料生物相容性好、粒徑小及相對表面積大、能增加制劑在腸系黏膜的黏附性等多方面優(yōu)勢，從而能夠顯著提高藥物的口服生物利用度，在難溶性藥物口服給藥方面受到廣泛的關(guān)注。
　　普通脂質(zhì)納米載體（非 PEG化）口服后易被胰脂肪酶降解，使包載于其中的藥物快速析出或暴露在胃腸道環(huán)境中受到酶降解，因而影響藥物的口

2、服吸收，導(dǎo)致生物利用度差異性較大。對藥物結(jié)構(gòu)進行PEG化改造或使用PEG化材料制備藥物載體被證實也能夠增加藥物的生物利用度。但是，PEG化脂質(zhì)納米載體如何影響荷載藥物的口服吸收機制尚不十分清晰。
　　在本研究中，我們采用不同方法制備載非諾貝特（Fenofibrate，F(xiàn)N）的PEG化脂質(zhì)納米載體（PEGylated lipid nanocarriers，PLNs）和普通脂質(zhì)納米載體（Conventional lipid nanoc

3、arriers，CLNs），通過比較兩者在體外含胰脂肪酶和不含胰脂肪酶的介質(zhì)中的釋放、脂解情況，驗證并解釋了PEG化對脂質(zhì)納米載體的保護作用；并研究PLNs和CLNs經(jīng)口服后在大鼠胃腸道中的吸收情況，從而闡述脂質(zhì)納米載體的PEG化對模型藥物非諾貝特的吸收影響。
　　第一章，建立非諾貝特的分析方法，結(jié)合所制備脂質(zhì)納米載體的特點，采用離心超濾法測定其包封率。并且對含量測定進行方法學(xué)驗證，為下一步脂質(zhì)納米載體制備的處方篩選和工藝研究奠定

4、了良好的基礎(chǔ)。含量測定試驗結(jié)果表明：建立的實驗方法能滿足研究的需要，F(xiàn)N液相圖譜峰形良好,輔料對藥物測定無干擾。
　　第二章，以BCSII類藥物FN為模型藥物，采用溶劑擴散法制備載FN的PLNs（FN-PLNs）。以載體的粒徑和多分散系數(shù)（PDI）為指標，考察了處方各組分比例對制劑的影響，并通過形態(tài)特征、傅立葉紅外光譜學(xué)和體外釋放情況對制劑進行表征研究。結(jié)果表明：FN-PLNs粒徑為186.7 nm（PDI=0.207），包封率>

5、95％。處方中各組分比例顯著影響PLNs的粒徑、穩(wěn)定性和包封率。FN-PLNs通過透射電鏡觀察顯示為球形或類球形結(jié)構(gòu)，大部分粒子小于342 nm，分散均勻，無特別大的粒子存在。以0.5%SDS溶液為釋放介質(zhì)，采用逆相平衡透析法考察體外釋藥情況，結(jié)果顯示FN-PLNs與FN-CLNs的體外釋藥并無顯著區(qū)別，兩者相似性因子f2值為58，說明兩者具有相似的釋放行為。
　　第三章，通過脂質(zhì)納米載體胃腸道轉(zhuǎn)運行為研究，考察了FN-PLNs和

6、FN-CLNs在胃腸道轉(zhuǎn)運中的命運。脂質(zhì)納米載體與大鼠小腸提取液經(jīng)37℃孵育后，觀察載體粒徑的變化；通過在釋放介質(zhì)中加胰脂肪酶，計算體外釋放過程中藥物累積釋放率；通過體外模擬體內(nèi)腸液環(huán)境進行胰脂肪酶脂解實驗，進一步驗證脂質(zhì)納米粒的PEG化對脂解的阻滯作用。結(jié)果表明：相對于普通脂質(zhì)納米載體，在大鼠小腸液中孵育后，F(xiàn)N-PLNs粒徑改變明顯小于 FN-CLNs；在體外含有胰脂肪酶的釋放體系中，1 h后總累積釋放率兩者沒有顯著的區(qū)別，但在前2

7、0 min中，F(xiàn)N-CLNs的藥物釋放率明顯高于FN-PLNs，兩者相似性因子f2值為33，說明兩者的釋放有明顯的區(qū)別；體外脂解實驗結(jié)果顯示 FN-PLNs粒徑改變明顯小于FN-CLNs；說明了PEG化的脂質(zhì)納米粒能夠減少粘蛋白的黏附和抑制胰脂肪酶對脂質(zhì)材料的降解。
　　第四章，采用大鼠灌胃法觀察制劑在大鼠體內(nèi)的藥動學(xué)情況。以市售Lipanthyl?膠囊內(nèi)容物作為參比制劑，考察FN-PLNs和FN-CLNs的相對生物利用度。結(jié)果表

8、明：與市售微粉化制劑的生物利用度做對比，F(xiàn)N-PLNs和FN-CLNs的相對利用度分別為157.0%和123.9%。FN-PLNs的血藥濃度-時間曲線下面積（AUC0–t＝51.04μg?h/mL）比 FN-CLNs（AUC0–t＝41.19μg?h/mL）和市售Lipanthyl?膠囊內(nèi)容物（AUC0–t＝32.52μg?h/mL）的均顯著提高，說明通過PEG化的脂質(zhì)納米載體遞送藥物，能顯著地增加非諾貝特的生物利用度。根據(jù)前面的研究結(jié)

9、果，分析了脂質(zhì)載體的體外釋放和體內(nèi)吸收之間的體內(nèi)外相關(guān)性（IVIVC），初步闡釋脂質(zhì)納米載體的PEG化如何減少粘蛋白的黏附和抑制胰脂肪酶對脂質(zhì)材料的脂解速率，從而進一步改善 BCSII類藥物的口服生物利用度。
　　通過本研究，能較好的理解脂質(zhì)納米載體在體內(nèi)的處置過程，當(dāng)載藥脂質(zhì)納米粒經(jīng) PEG脂質(zhì)材料修飾后，能減少胃腸道游離粘蛋白對納米粒的黏附和延緩脂肪酶對脂質(zhì)的降解作用，因而能有效的提高口服藥物的生物利用度。本文對脂質(zhì)納米粒的體