T-20化學修飾物的生物活性評價.pdf

1、T-20是阻止HIV-1進入宿主細胞的抗病毒融合抑制劑，但其極短的血漿半衰期限制了T-20的臨床應用。為了促進長效抗HIV多肽藥物的開發(fā)，本文使用HIV△ENV假病毒/Ghost細胞體系對11種T-20化學修飾物進行了生物活性評價。首先以GFP報告基因質粒作為表達載體，分別以Lipofectamine TM 2000和25KD線性PEI為轉染試劑，通過細胞轉染實驗對比了兩種轉染試劑對假病毒包裝細胞(293T)的轉染效率。其次，以PEI為

2、轉染試劑成功進行了假病毒的包裝并測定了制備假病毒的感染活性。最后，將系列稀釋的修飾物與等量假病毒共孵育后感染Ghost-CXCR4細胞，根據不同稀釋度下假病毒Luc報告基因的表達量繪制出各種修飾物對假病毒的抑制曲線并得到了相應半數(shù)抑制濃度(IC50)。結果顯示，PEI比Lipofectamine TM 2000對293T細胞系具有較高的轉染效率；假病毒對Ghost-CXCR4細胞的感染活性與病毒接種量呈正向線性關系；在11種修飾產物中C