枸杞多糖的結(jié)構(gòu)及細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)活性研究.pdf

1、本文以枸杞為原料，研究枸杞多糖的分離純化工藝、組成結(jié)構(gòu)及對人肝癌細(xì)胞SMMC-7721的細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)活性的研究。
　　枸杞多糖醇沉的最佳條件為:50mL水提液加入95％乙醇80mL，室溫醇沉12小時，反復(fù)醇沉5次。最佳的脫色條件為多糖溶液∶氯仿∶正丁醇=25∶5∶1(v/v/v)。枸杞多糖得率為0.92(g/100g)，換算因子為1.85。DEAE纖維素可以將枸杞多糖分為6個組分，收集LBP-4和LBP-5，用SephedexG-

2、75進行純化，經(jīng)純度檢驗，結(jié)果表明表明LBP-4和LBP-5都是均一的多糖組分。
　　經(jīng)HPLC檢測得出LBP-4的數(shù)均分子質(zhì)量(M)n為866130D，LBP-5的(M)n為1412100D。LBP-4中性糖、半乳糖醛酸、蛋白質(zhì)含量分別為71.2％、16.0％、2.10％，LBP-5為67.3％、23.2％、3.1％。通過氣相色譜得出LBP-4由巖藻糖、核糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、甘露糖、半乳糖組成，摩爾比為13.0∶

3、1.0∶19.2∶4.2∶1.1∶4.1∶14.3∶9.5;LBP-5由巖藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖、甘露糖、半乳糖組成，其摩爾比為3.2∶5.1∶1.0∶20.5∶2.0∶26.4。剛果紅實驗結(jié)果表明兩種多糖不具有三股螺旋結(jié)構(gòu)。β消去實驗表明枸杞多糖的糖鏈與肽鏈之間是O-型連接。通過高碘酸氧化和Smith降解結(jié)果表明:枸杞多糖均含有較多的1-3、1-4糖苷鍵。紫外光譜結(jié)果表明:枸杞多糖不含核酸，蛋白質(zhì)含量較低。紅外光譜結(jié)果表明兩種

4、多糖中可能含有-OH、-NH2、-NH-、-CH2、-C=O、-CO-、-C-O、-COOH等基團。電鏡掃描結(jié)果表明:枸杞多糖呈松散的片狀和束狀結(jié)構(gòu)。原子力顯微鏡觀察結(jié)果表明:枸杞多糖分子聚集在一起呈大小不一邊緣不規(guī)則的球狀或島嶼狀。
　　MTT實驗表明兩種多糖對SMMC-7721細(xì)胞的生長均有一定的抑制作用，LBP-5抑制細(xì)胞生長的作用更強。倒置顯微鏡及激光掃描共聚焦顯微鏡進行形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果表明:枸杞多糖作用人肝癌細(xì)胞SMMC-