酵母細胞基因組中與鈣離子穩(wěn)態(tài)相關基因的功能研究.pdf

1、通過基因組規(guī)模的遺傳學篩選,我們鑒定出了120個對鈣離子敏感的釀酒酵母基因缺失株。這些基因的功能與細胞代謝、蛋白質分選、離子穩(wěn)態(tài)、轉錄、細胞內運輸、細胞周期和高滲脅迫應答等方面相關。其中7個基因編碼ESCRT-I,-II,和-III蛋白復合物的成分,這些復合物的功能是形成能夠分選蛋白質到液泡或溶酶體的多泡復合體(MVB)。在胞外鈣離子脅迫條件下,這些ESCRT缺失株的細胞質內鈣離子濃度升高,并激活鈣調磷酸酯酶,但是編碼內質網(wǎng)/高爾基體膜

2、上的鈣泵基因PMR1的表達量卻降低了。之前的研究表明,在這些ESCRT缺失株中,Rim101蛋白不能被正常剪切。我們的研究證明,這些缺失株的鈣離子敏感性至少部分是由于Nrg1表達量的升高從而抑制了PMR1的表達引起的,并且這些菌株對鈣離子的敏感性可以被組成型激活型Rim101(C端缺失型)的表達所抑制。7個ESCRT缺失株背景下PMC1的敲除能夠增加ESCRT缺失株對鈣離子的敏感性,而PMR1的敲除則無明顯的影響。Nrg1在體外和體內均