甘油磷酸膽堿的結(jié)晶、結(jié)構(gòu)解析及年產(chǎn)100噸原料藥工藝設(shè)計(jì).pdf

1、甘油磷酸膽堿(GPC)是磷脂酰膽堿(PC)分子上兩條脂肪酸鏈完全被水解的產(chǎn)物,是人體內(nèi)正常存在的水溶性小分子物質(zhì)。同時(shí)它也是重要的神經(jīng)傳遞介質(zhì)乙酰膽堿(Acetylcholine)的生物合成前體,可以幫助腦部進(jìn)行學(xué)習(xí)、記憶等活動(dòng),甚至是修復(fù)老年癡呆早期患者已部分受損的認(rèn)知能力。
　　本論文在實(shí)驗(yàn)室前期研究的基礎(chǔ)上,首先對(duì) GPC的結(jié)晶工藝進(jìn)行了研究。探討兩種制備 GPC晶體方案,最終選擇了將過氧化二鋁后的 GPC油狀物粗品通過兩步

2、結(jié)晶法制備 GPC純品,純度達(dá)99.5％以上,最優(yōu)結(jié)晶條件為按乙醇體積與 GPC質(zhì)量2.5:1,70℃水浴溶解,0.22μm有機(jī)膜過濾,冰水浴30min降55℃,放0℃冰箱靜置結(jié)晶28h得到一次結(jié)晶產(chǎn)品。將一次結(jié)晶產(chǎn)品重新溶解后進(jìn)行重結(jié)晶,得到重結(jié)晶產(chǎn)品。結(jié)果分析顯示,經(jīng)過重結(jié)晶的 GPC樣品純度達(dá)到藥品的申報(bào)要求。根據(jù)小試實(shí)驗(yàn)確定了制備GPC晶體的主要工藝流程并進(jìn)行了放大試驗(yàn),放大實(shí)驗(yàn)結(jié)果和小試的實(shí)驗(yàn)結(jié)果基本相同。
　　其次,對(duì)

3、結(jié)晶獲得的 GPC純品進(jìn)行了結(jié)構(gòu)分析。通過蒸發(fā)光高效液相、元素分析、DSC、核磁(1H-NMR,1H-1H COSY,13C-NMR,13C-DEPT,13C-1H HSQC,13C-1H HMBC,31P-NMR)、質(zhì)譜(MS)、單晶衍射(XRD)以及結(jié)合文獻(xiàn)信息,確定了 GPC的結(jié)構(gòu)。同時(shí)制備出 GPC單晶,X-射線單晶衍射結(jié)果表明該化合物為正交晶系, P212121手性空間群,晶胞:a=7.08030(10)10-10m, b=1

4、1.4303(2)10-10m, c=14.8078(2)10-10m,α=β=γ=90.00°,對(duì) GPC晶型進(jìn)行了補(bǔ)充,為今后的 GPC在制劑中晶型的選擇提供了參考。
　　研究了 GPC晶體制備過程中的雜質(zhì):通過考馬斯亮藍(lán)法( Bradford法)及紫外全波長(zhǎng)掃描確定了 GPC純品中沒有磷脂酶殘留。利用蒸發(fā)光高效液相和原子吸收光譜確定了酶法制備的 GPC粗品及一次結(jié)晶產(chǎn)品中含有雜質(zhì)醋酸鈉,為 GPC以后生產(chǎn)過程中雜質(zhì)控制提夠了

5、依據(jù)。
　　依據(jù)以上實(shí)驗(yàn)研究得到的工藝數(shù)據(jù),完成了年產(chǎn)100噸 GPC原料工藝設(shè)計(jì)。本次設(shè)計(jì)是基于脂肪酶催化水解磷脂酰膽堿的成熟工藝來生產(chǎn) GPC的。通過實(shí)驗(yàn)過程探究,了解和掌握了酶法制備 GPC工藝流程,確定了符合工業(yè)化生產(chǎn)的相關(guān)工藝參數(shù),最終完成了對(duì)年產(chǎn)100噸成品 GPC的工業(yè)化生產(chǎn)流程設(shè)計(jì)。設(shè)計(jì)過程是參照2010版GMP相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行的,所以在設(shè)計(jì)過程中對(duì)設(shè)計(jì)相關(guān)的一些工藝操作等提出的要求是完全符合標(biāo)準(zhǔn)的。本設(shè)計(jì)旨在為今后大