雌激素殘留檢測技術(shù)的研究與應用.pdf

1、隨著工業(yè)社會的繁榮發(fā)展，人類日益暴露在雌激素環(huán)境中，雌激素直接或間接地對人類與動物造成不同程度的危害，甚至導致癌變死亡。2000年，國家自然科學基金委員會以“環(huán)境類激素影響人類健康的機理”為重點項目予以招標，在我國正式啟動了對環(huán)境激素類物質(zhì)的大規(guī)模研究。而到目前為止，有關(guān)雌激素的檢測手段還比較單一，多渠道、多角度、快速、靈敏的檢測手段有待進一步開發(fā)與加強，以便實現(xiàn)對雌激素的長效監(jiān)控。
　　本論文從以下幾個方面展開研究工作：

2、　　一、本研究利用高效液相(HPLC)色譜法來實現(xiàn)對雌二醇、雌三醇、炔雌醇、雌素酮、乙烯雌酚的精確靈敏檢測。在優(yōu)化色譜條件下，建立以上5種雌激素的標準曲線，且R2≥0.9992。并利用該方法對同一組樣品進行5次平行實驗，確定其相對標準偏差在2.5％以內(nèi)。且分別以鴨、鵝、魚進行不同濃度的加標實驗，實驗結(jié)果表明不同加標濃度，其加標回收率均在87.1%～103.5%之間。并且本實驗對來自浙江、江蘇5個不同地區(qū)的鴨、鵝、魚15個樣品進行檢測分析

3、。以上實驗結(jié)果表明，該方法靈明度高，回收率好，重現(xiàn)性強，且樣品制備較簡單，因此適用于水禽及水產(chǎn)品中雌激素的檢測。
　　二、基于薄層石墨烯優(yōu)異的導電性及生物兼容性及表面吸附性，構(gòu)建了基于薄層石墨烯的酪氨酸酶生物傳感器。本研究首先利用化學還原法制備了薄層石墨烯，并利用透射電鏡(TEM)，選區(qū)電子衍射(SAED)對其進行表征。然后將薄層石墨烯、殼聚糖、酪氨酸酶按一定比例混合，制備石墨烯-酪氨酸酶-殼聚糖電極(GR-Tyr-CS/GCE)

4、。在優(yōu)化pH及溫度等檢測條件后，電流-時間法(I-T)測得雙酚A(BPA)的濃度線性范圍為7.5×10-8~2.5×10-6mol L-1，相關(guān)系數(shù)R2=0.997，檢測限為：2.18×10-8mol L-1(信噪比S/N=3)。這項工作將為BPA殘留提供靈敏、快速、簡便的檢測方法。
　　三、基于石墨烯-金復合物的生物兼容性、表面吸附性及優(yōu)異的電子傳輸性，以及酪氨酸酶對 BPA的催化氧化還原作用，構(gòu)建了基于石墨烯/金的酪氨酸酶生物

5、傳感器。利用透鏡(TEM)、拉曼(Rama)、能譜(EDS)等技術(shù)表征石墨烯/金復合材料，并制備石墨烯/金-酪氨酸酶-殼聚糖電極(GR/Au-Tyr-CS/GCE)。在一定濃度的BPA溶液中進行循環(huán)伏安掃描，優(yōu)化底液 pH及溫度等檢測條件，利用差分脈沖伏安法(DPV)測得 BPA的濃度線性范圍為2.5×10-8~3×10-6 mol L-1，線性回歸方程為Ip=3.156C+11.437，相關(guān)系數(shù)R2=0.998，檢測出現(xiàn)為1.64×1