奧司他韋分子印跡聚合物的合成與評價.pdf

1、分子印跡聚合物(MIP)具有分子識別性強、固定相制備簡便快速、性質(zhì)比較穩(wěn)定、溶劑消耗量小、模板和MIP都可以回收再利用等優(yōu)點,在對映體和異構(gòu)體的分離、固相萃取、緩控釋給藥系統(tǒng)、臨床藥物分析、膜分離技術(shù)、模擬酶催化、化學仿生傳感器等領(lǐng)域中展現(xiàn)了良好的應(yīng)用前景。以MIP為基礎(chǔ),針對傳統(tǒng)抗病毒藥物篩選既繁瑣危險性較高,又對實驗條件要求極高的缺點,建立抗病毒中藥有效成分分離篩選鑒定一體化的非生物學藥物篩選技術(shù)具有重要的應(yīng)用價值。本文以奧司他韋(

2、OS)為模板分子,用本體聚合法合成了分子印跡聚合物并進行評價,期以應(yīng)用OSMIP-HPLC-MS法篩選新型抗流感病毒化合物。
　　 1、概述了抗流感病毒的藥物及其作用原理,非生物學藥物篩選方法的定義及各種方法的研究現(xiàn)狀,分子印跡聚合物的合成方法、試劑選擇及其在有效成分群的分離、活性成分篩選和抗病毒藥物領(lǐng)域的應(yīng)用情況。
　　 2、建立了薄層色譜法對OS的快速攀別。以甲醇-乙酸乙酯-甲苯-三乙胺(2:4:2:1)為展開劑,硅

3、膠GF254板展開后,254 nm下出現(xiàn)暗斑,Rf約為0.5。
　　 3、應(yīng)用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀,建立OS的含量測定方法。應(yīng)用C18柱,流動相甲醇-水(75:25,V／V),結(jié)果顯示OS準分子離子峰[M+H]+m／z313.30,子離子m／z166.20和208.20分別為定量離子和輔助定性離子,在5～160 ng·mL-1的范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(R2=0.9995),平均回收率為100.94％,日內(nèi)精密度和日間精密度分別為99.

4、89％和98.90％。
　　 4、以印跡聚合物對OS的吸附量為指標,應(yīng)用U8(82×42)均勻設(shè)計優(yōu)化了OS—MIP的合成參數(shù)。優(yōu)化后的結(jié)果為:0.1 mmol的OS,功能單體0.69 mmol,EGDMA5 mmol,30％AA+70％4-VP作為功能單體,致孔劑選用甲苯。所合成的OS-MIP和NIP對OS的吸附最分別為220.9543μg·50mg-1和12.0817μg·50 mg-1。
　　 5、應(yīng)用掃描電鏡,對

5、聚合物進行形態(tài)學觀察。合成的OS-MIP與NIP相比質(zhì)地較松,易碎。從掃描電鏡照片中可以清楚的看到位于OS-MIP網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中的小孔。相比于OS—MIP,NIP表面較為光滑,孔穴也比較小而且數(shù)最少。
　　 6、為了確定OSMIP-HPLC自制柱對模板分子的吸附能力,應(yīng)用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜進行了OSMIP-HPLC自制柱對OS、阿司匹林、綠原酸、連翹苷及混合物分離情況的測定。結(jié)果顯示OSMIP-HPLC柱能夠完全地分離模板分子及其他化

6、合物。阿司匹林、綠原酸、連翹苷的保留時間在35min左右,模板分子的保留時間在110 min左右(理化性質(zhì)不同,保留時間會有所變化)。
　　 從以上結(jié)果可以看出,應(yīng)用薄層色譜檢測OS的方法操作簡便、快速,可用于市面上OS的真?zhèn)舞b別；應(yīng)用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜進一步測定OS含量的方法,為下一步檢測分子叩跡聚合物對模板分子的吸附量提供了技術(shù)支持；應(yīng)用均勻設(shè)計優(yōu)化OS-MIP合成參數(shù),得到的OS—MIP對OS有較強的吸附性；對聚合物進行掃描