核酸檢測與線粒體染色熒光染料的合成與應(yīng)用.pdf

1、近年來，隨著生物成像技術(shù)的不斷發(fā)展，熒光染料越來越多地應(yīng)用于細(xì)胞標(biāo)記及成像、蛋白質(zhì)分析、DNA測序、醫(yī)學(xué)診斷、生物傳感等研究領(lǐng)域，而菁染料由于具有優(yōu)異的光譜性能，且易于合成和純化，廣泛受到了研究人員的關(guān)注。
　　核酸是遺傳信息的攜帶者和基因表達(dá)的物質(zhì)基礎(chǔ)，它在生物的生長、發(fā)育、繁殖等正常生命活動中起著十分重要的作用。同時，核酸結(jié)構(gòu)的變化與生命的異常情況密切相關(guān)，如遺產(chǎn)性疾病、腫瘤的發(fā)生、放射性損傷等。因此，深入研究核酸的結(jié)構(gòu)與功能

2、，以及核酸與各種有機(jī)、無機(jī)分子的作用模式和作用性質(zhì)對于揭開生命的奧秘，了解生命的本質(zhì)，治療遺傳疾病和腫瘤等等都具有重要意義。本文合成的MT-SYBR染料在水溶液中本體熒光極弱，但當(dāng)其與DNA結(jié)合后能迅速的發(fā)出很強(qiáng)的熒光（熒光量子產(chǎn)量達(dá)0.509）。DNA滴定實驗結(jié)果表明探針對DNA的檢測靈敏度很高，檢測限達(dá)0.47ng/ml，可實現(xiàn)DNA濃度范圍為0～1800 ng/ml定量檢測。MT-SYBR與飽和量的DNA結(jié)合后可在5s內(nèi)熒光增強(qiáng)5

3、50倍。更重要的是，MT-SYBR具有很好的細(xì)胞膜通透性，能夠清晰地染色活細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞核，具有很好的應(yīng)用前景。
　　被視為生命“動力工廠”的線粒體參與了細(xì)胞內(nèi)一系列重要的生命過程，比如調(diào)控細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度以及細(xì)胞凋亡過程等。線粒體對一系列的細(xì)胞損傷極其敏感，從老年癡呆到癌癥等許多疾病患者體內(nèi)均能觀察到線粒體在數(shù)量、大小、結(jié)構(gòu)等方面的變化?，F(xiàn)階段用于線粒體成像的熒光染料主要是基于菁染料和羅丹明類染料開發(fā)的，為了豐富此類染料的種類，本文