禾長蠕孢菌孢子生產(chǎn)及其制劑加工研究.pdf

1、禾長蠕孢菌(Helminthosporium gramineum Rabenh.f.sp.echinochloae,簡稱HGE)是從廣西自然感病稗草上分離得到的雜草生防潛力菌。耿銳梅等用禾長蠕孢菌孢子懸浮劑在田間進行雜草防除試驗發(fā)現(xiàn)3.0×107孢子／m2懸浮劑對稗草防效可達到85.2％,對稻田中的其它常見雜草也有較強的致病作用并對水稻、小麥、玉米、棉花、油菜等主要作物安全。因此,禾長蠕孢菌具有開發(fā)成真菌除草劑的潛力,其孢子可作為真菌除

2、草劑的主要活性成分。然而,禾長蠕孢菌在大規(guī)模生產(chǎn)中孢子產(chǎn)量較低,劑型加工技術困難,使其商品化受到限制。本研究對禾長蠕孢菌固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件進行優(yōu)化,期望通過條件優(yōu)化將孢子產(chǎn)量提高到107孢子／克干物質以上。放大發(fā)酵體系,保證孢子產(chǎn)量及質量基本不變,為工業(yè)化生產(chǎn)打下了堅實基礎。制劑研制過程中,綜合評價助劑的分散力、穩(wěn)定性、懸浮率以及與孢子的生物相容性,篩選出對禾長蠕孢菌孢子無毒或毒性較小的助劑種類,并通過二次通用旋轉組合試驗優(yōu)化助劑

3、組合。期望通過劑型研究減少禾長蠕孢菌孢子對結露期的依賴,刺激孢子萌發(fā),提高毒力、擴散能力及粘著力,避免紫外損傷等。劑型的成功研制決定了微生物除草劑的開發(fā)、登記注冊和商品化。本文的研究內(nèi)容及結果如下:
　　 禾長蠕孢菌固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)孢培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件研究。以珍珠巖為底物基質,每100mL珍珠巖(大約7.1g)中添加4g米粉、1g豆粕粉、0.2g Na3PO4·12H2O、0.1g MgSO4,水分添加量為40mL,(培養(yǎng)基含水量約為7

4、6.5％),接入8mL,菌懸液,攪拌均勻,黑暗條件下28℃靜置培養(yǎng)14d,黑光燈12h循環(huán)光照,誘導產(chǎn)孢。孢子最高產(chǎn)量可達1.12×107孢子／克干物質。
　　 禾長蠕孢菌固態(tài)發(fā)酵擴大培養(yǎng)研究。擴大固態(tài)發(fā)酵體系,在大托盤上進行禾長蠕孢菌固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)孢試驗,培養(yǎng)基組成按上述結果等比例擴大,培養(yǎng)條件采用優(yōu)化后的條件。試驗結果表明,利用大托盤進行固態(tài)發(fā)酵的最高產(chǎn)孢量可以達到1.45×107孢子／克干物質。隨后,用真菌孢子分離器收集培養(yǎng)物

5、中的孢子,并對所獲孢子粉進行孢子質量檢測。結果表明,孢子粉的含水量為7％～8％,孢子粉的含孢量為3.02×107孢子／克,孢子萌發(fā)率基本在99％以上,說明擴大培養(yǎng)所獲得的孢子質量和孢子產(chǎn)量能夠達到標準,可以作為劑型研究的原材料。
　　 禾長蠕孢菌孢子制劑研究。研究發(fā)現(xiàn)珍珠巖粉末對菌絲體生長沒有影響,孢子粉(g):珍珠巖粉末(g)的最佳混合比例為3:1。大豆油對菌絲體生長沒有影響,按照孢子粉(g):大豆油(mL)為2:1比例混合后