噬藻體感染對銅綠微囊藻905周期蛋白的影響.pdf

1、隨著我國工農(nóng)業(yè)的迅猛發(fā)展和城市化進(jìn)程的加快，生活污水、工業(yè)廢水、農(nóng)業(yè)灌溉廢水中污染物的排放量日益增加，加上人們環(huán)保意識薄弱，湖泊富營養(yǎng)化問題日漸突出，各水系頻發(fā)水華現(xiàn)象。藻類的大量繁殖威脅著水系統(tǒng)的質(zhì)量與安全，因此水華的有效控制和治理具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。對水華進(jìn)行生物控制的微生物主要有細(xì)菌、放線菌、原生菌、真菌、噬藻體，其中噬藻體是一種能夠高效分解藍(lán)藻的病毒，對藍(lán)藻水華的治理有重要的潛在意義，近年來受到大家越來越多的關(guān)注。
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2、實(shí)驗(yàn)室從太湖篩選到一株能夠感染銅綠微囊藻905的噬藻體，根據(jù)其理化性質(zhì)的研究，進(jìn)一步探討了該噬藻體的感染對宿主細(xì)胞周期蛋白表達(dá)和細(xì)胞周期的影響。
　　(1)通過FeCl3化學(xué)絮凝法、超濾法、PEG6000濃縮法濃縮噬藻體，結(jié)果表明，F(xiàn)eCl3化學(xué)絮凝濃縮法濃縮噬藻體回收率為67.65％，超濾法濃縮噬藻體回收率為71.84％，PEG6000濃縮法濃縮噬藻體的回收率為48.32％。
　　(2)采用凍融法、超聲波法、研磨法對不同密

3、度破碎銅綠微囊藻905細(xì)胞進(jìn)行破碎，結(jié)果表明凍融法破碎效率受細(xì)胞密度影響不大，超聲波法、研磨法隨著細(xì)胞密度的增加破碎效率略有增加。凍融四次、超聲波破碎細(xì)胞8min以后藻細(xì)胞破碎效率均可達(dá)到90％以上，研磨法研磨8min后細(xì)胞破碎率在80％左右。
　　(3)用顯微鏡對藻細(xì)胞計數(shù)、雙層平板法對噬藻體計數(shù)結(jié)果顯示，對照組中由于噬藻體失活失去感染效力，藻細(xì)胞數(shù)量持續(xù)增長，0h時藻細(xì)胞個數(shù)為2.4×106個/mL，48h后達(dá)到5.5×106

4、個/mL。試驗(yàn)組中加入噬藻體后，噬藻體數(shù)量持續(xù)增長，從0h的6×105個/mL增加到48h的1.92×106個/mL;噬藻體加入初期，刺激藻細(xì)胞增殖，藻細(xì)胞的數(shù)量經(jīng)歷了緩慢增長，18h后呈顯著下降趨勢，從0h的2.25×106個/mL減少到48h的4.8×105個/mL。
　　(4)采用超濾法濃縮噬藻體，感染銅綠微囊藻905，凍融法破碎感染后的藻細(xì)胞，提取蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)印跡結(jié)果表明，噬藻體加入初期刺激了藻細(xì)胞的增殖，噬藻體可能通過