海鞘降血脂有效部位的利用技術(shù)研究.pdf

1、隨著人們生活水平的提高，高血脂癥發(fā)病率高，危害大，降血脂藥物或功能食品的需求旺盛，其中多不飽和脂肪酸是降血脂功效成分之一。海鞘是一類典型的海洋污損生物，過度繁殖，嚴(yán)重影響海洋生態(tài)環(huán)境。國外學(xué)者在對其進(jìn)行抗腫瘤藥物的研發(fā)中已取得了舉世矚目的成就；海鞘同樣是富含多不飽和脂肪酸的重要生物資源，我們前期研究發(fā)現(xiàn)，某些海鞘脂溶性提取物具有一定的降血脂活性，因此作為降血脂天然藥物或功能食品的新資源，具備較好的開發(fā)利用潛力。
　　目前國內(nèi)外對星

2、座短腹海鞘（Aplidium constellatum）和皺瘤海鞘（Styela plicata）降血脂脂溶性成分的文獻(xiàn)報道較少，而且大部分集中在其他活性次級代謝產(chǎn)物的分析上，鮮有對其降血脂活性的研究報道。為了開發(fā)降血脂天然藥物或功能食品的新資源，本研究在前期研究工作的基礎(chǔ)上，開展兩種海鞘原料中脂溶性成分的季節(jié)變化研究，以及有效部位的提取工藝、質(zhì)量分析和化學(xué)成分背景研究，為將來海鞘降血脂有效部位的產(chǎn)品開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
　　選取富含多

3、不飽和脂肪酸的海鞘優(yōu)勢物種——星座短腹海鞘和皺瘤海鞘為研究對象，利用溶劑低溫動態(tài)提取的方法對不同時間同一地點及同一時間不同地點采集的海鞘樣品的脂溶性成分進(jìn)行提取，計算提取率并探究脂溶性成分的季節(jié)性變化規(guī)律，建立原料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果表明，隨季節(jié)的變化，同一地點采集的星座短腹海鞘樣品其脂溶性成分提取率有所不同但無明顯差異；同一時間不同地點采集的皺瘤海鞘，其脂溶性成分的提取率自北向南呈遞增趨勢。綜合提取率及可采集生物量因素，認(rèn)為用于提取脂溶性部

4、位的星座短腹海鞘的最佳采集時間為第二、三季度，皺瘤海鞘最佳采樣時間為第二季度。
　　采用正交試驗法對兩種海鞘脂溶性成分的提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，以提取率、類胡蘿卜素的含量2項指標(biāo)評定方法是否可行。通過正交試驗法確定2種海鞘降血脂有效成分的最佳提取條件組合均為A3B3C1，即料液比1：1.5（W/V）、提取時間8min、溶劑配比（正丁醇：乙酸乙酯）1：2（V/V）。最后通過提取驗證實驗表明：此條件組合是提取2種海鞘脂溶性有效成分的最優(yōu)條件

5、。
　　采用氣相色譜（GC）法、高效液相色譜（HPLC）法對海鞘脂溶性有效成分的質(zhì)量進(jìn)行了分析，發(fā)現(xiàn)在兩種海鞘的上述提取物HPLC分析中，磷脂含量相對較高，達(dá)到21.9?51.6％，而EPA+DHA含量低，僅有1.0~5.7%。
　　為了更好地了解海鞘資源的化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)，還對皺瘤海鞘的化學(xué)成分進(jìn)行了初步研究，而前期研究完成的星座短腹海鞘的化學(xué)成分可見于文獻(xiàn)。通過大孔樹脂柱、MCI、硅膠柱、Sephadex LH-20凝膠等柱

6、層析法及HPLC對皺瘤海鞘提取物進(jìn)行分離純化，經(jīng)質(zhì)譜、核磁共振等波譜分析法對分離純化得到的化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。最終從皺瘤海鞘的總提取物中分離鑒定11個化合物，分別為：（1）膽甾-5-烯-3β-醇、（2）4,8-二烯-鞘氨醇-十六碳酸酰胺、（3）胞嘧啶核苷、（4）2'-脫氧尿嘧啶核苷、（5）腺嘌呤核苷、（6）鳥嘌呤核苷、（7）2’-脫氧胸腺嘧啶核苷、（8）3-（2-磺基乙基氨基）-癸-7-烯酸、（9）色氨酸、（10）2,3,4,9-四氫-