雙歧桿菌顯色培養(yǎng)基的研制及配套檢測(cè)方法的建立.pdf

1、雙歧桿菌在腸道中的有益功能已受到人們的高度關(guān)注。越來(lái)越多的雙歧桿菌被添加到食品和保健品中，因此雙歧桿菌定性定量檢測(cè)對(duì)食品或保健品的質(zhì)量控制和監(jiān)測(cè)顯得尤為重要。目前雙歧桿菌的檢測(cè)使用最為廣泛的仍是國(guó)標(biāo)方法，這種方法雖然能夠準(zhǔn)確地計(jì)數(shù)，但也存在檢測(cè)周期長(zhǎng)、操作復(fù)雜、費(fèi)力耗時(shí)等缺點(diǎn)。
　　為建立準(zhǔn)確、快捷的雙歧桿菌定性定量方法，我們以LBS瓊脂為基礎(chǔ)，添加能夠抑制或促進(jìn)雙歧桿菌生長(zhǎng)的物質(zhì)，同時(shí)添加酶顯色底物，通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)，經(jīng)方差分析，確

2、定最佳配方，形成雙歧桿菌顯色培養(yǎng)基。
　　通過(guò)實(shí)驗(yàn)，我們發(fā)現(xiàn)該雙歧桿菌顯色培養(yǎng)基，使雙歧桿菌能夠生長(zhǎng)良好，并顯藍(lán)色,對(duì)保加利亞乳桿菌、嗜酸乳桿菌、嗜熱鏈球菌、沙門氏菌、大腸埃氏菌和金黃色葡萄球菌均有一定的抑制作用，或顯白色，從而準(zhǔn)確、有效在顯色平板上區(qū)分開(kāi)來(lái)。利用設(shè)計(jì)出來(lái)的顯色培養(yǎng)基建立起檢測(cè)雙歧桿菌的顯色培養(yǎng)基平板計(jì)數(shù)方法，先以雙歧桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株和其他食源性標(biāo)準(zhǔn)菌株評(píng)價(jià)了該檢測(cè)方法的特異性和靈敏度，然后再以200份市場(chǎng)上購(gòu)買的自然

3、樣品為盲樣，評(píng)價(jià)了該檢測(cè)方法的實(shí)用性，包括檢測(cè)成本、檢測(cè)用時(shí)以及檢測(cè)準(zhǔn)確性等，所有評(píng)價(jià)過(guò)程均以國(guó)標(biāo)方法為參照。結(jié)果：該顯色培養(yǎng)基在36℃培養(yǎng)48h就可以直接計(jì)數(shù)，顯色清楚，結(jié)果易于觀察，檢測(cè)成本明顯低于國(guó)標(biāo)的檢測(cè)方法；該顯色培養(yǎng)基具有較高的特異性，通過(guò)對(duì)200份自然樣品的檢測(cè)評(píng)價(jià)，課題所建立的方法與國(guó)標(biāo)方法準(zhǔn)確性比較，差異無(wú)顯著性（F=3.7946，P＞0.05）。結(jié)論：課題研制的雙歧桿菌顯色培養(yǎng)基具有成本低、快速、特異性高、準(zhǔn)確性好等