茶葉主要糖苷類香氣前體物質的色譜-質譜聯(lián)用分析研究及初步分離.pdf

1、茶鮮葉中的糖苷類香氣前體是茶樹生長發(fā)育過程中形成的次級代謝產(chǎn)物,其含量較少且無味。在特定條件下,如采摘、機械損傷、昆蟲取食、病菌侵染等,葉片中糖苷類香氣前體與內源酶接觸會酶解釋放出揮發(fā)性苷元,呈現(xiàn)出特定的氣味,是構成成品茶香氣的物質基礎。由于糖苷類香氣前體在茶葉中含量極低,難以分離獲得完整的標樣,因而無法進行定量分析,制約了該領域研究的深入。本文對茶葉中糖苷類香氣前體進行了初步的分析鑒定和分離純化,為其后續(xù)的大量分離制備研究及定量分析方

2、法的建立提供參考,總結如下:
　　1.糖苷類香氣前體的富集
　　用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇4種極性由小到大的溶劑對綠茶樣品依次進行超聲波提取,GC-MS輔助分析各提取部位酶解后的揮發(fā)性苷元,確定糖苷類香氣前體在甲醇部位富集;使用HPD-500大孔吸附樹脂對甲醇部位提取物進行柱色譜分析,用不同濃度的甲醇梯度洗脫,GC-MS分析各洗脫部位酶解后的苷元。分析結果表明,大孔吸附樹脂對糖苷類香氣前體有很好的富集作用,香氣前體主

3、要集中在20％甲醇部位;對20%甲醇部位樣品用氯仿萃取去除咖啡堿,堿式乙酸鉛沉淀茶多酚,得糖苷類香氣前體粗提物。
　　2.綠茶中糖苷類香氣前體的分析鑒定
　　對粗提物中糖苷類香氣前體進行分析鑒定。
　?、俨捎蔑w行時間質譜(TOF/MS)得出準確相對分子量和匹配的分子式,并結合高效液相色譜-電噴霧多級質譜(HPLC-ESI-MSn)鑒定了11種糖苷類香氣前體物質;
　?、谔接懥瞬枞~中可能存在的糖苷類香氣前體在ESI

4、(-)離子模式下的裂解規(guī)律。
　　3.糖苷類化合物的分離純化
　　利用多種色譜分離方法(硅膠柱色譜、Sephadex LH-20凝膠柱色譜、ODS柱)對糖苷類香氣前體粗提物進行分離,采用電噴霧質譜(ESI-MS)和核磁共振譜(13C-NMR、1H-NMR)對分離得到的化合物進行結構鑒定,共分離到3個糖苷類化合物,分別為:山柰酚-3-O-β-葡萄糖苷(化合物4)、松柏醇-β-D葡萄糖苷(化合物5)、腺嘌呤核苷(化合物6);3個