新型功能化磷酸蛋白富集材料合成與性能研究.pdf

1、蛋白質(zhì)在生命活動(dòng)中起著重要的作用，并且它是生命現(xiàn)象的直接體現(xiàn)者，在醫(yī)學(xué)中研究生理或病理的機(jī)制也都是建立在蛋白質(zhì)水平上的。與此同時(shí)，各種形式和行為活動(dòng)的蛋白質(zhì)，如翻譯后修飾、蛋白質(zhì)之間的相互作用以及表現(xiàn)形式都需要我們對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行進(jìn)一步研究。大多數(shù)的蛋白質(zhì)在翻譯后在不同的基團(tuán)會(huì)發(fā)生不同的修飾，例如磷酸化修飾。蛋白質(zhì)的選擇性和可逆性磷酸化修飾在生命活動(dòng)的調(diào)節(jié)機(jī)制過(guò)程中起到了比較重要的作用，體內(nèi)中30-50％的蛋白質(zhì)都有可能受到可逆性磷酸化修飾

2、。在近些年，生物質(zhì)譜已經(jīng)取代一些傳統(tǒng)的手段作為研究磷酸化的分析技術(shù)，但是由于磷酸化蛋白的多樣性、磷酸化位點(diǎn)自然存在時(shí)間短以及相對(duì)較低的豐度使得磷酸化位點(diǎn)很難檢測(cè)到，因此開(kāi)發(fā)一種更加有效分離和富集磷酸化蛋白質(zhì)的方法是十分有必要的。
　　本文是通過(guò)Stober法合成了單分散的二氧化硅微球，并通過(guò)衍生實(shí)驗(yàn)在二氧化硅微球上嫁接雙鍵以形成二氧化硅材料的載體。另外，本實(shí)驗(yàn)又合成了陰離子受體名為1-(3，5-二三氟甲基-苯基)-3-(4-乙烯基

3、苯基)脲的功能單體，并在交聯(lián)劑N，N-亞甲基雙丙烯酰胺以及引發(fā)劑引發(fā)作用下在二氧化硅載體表面修飾了一層聚合物，合成了一種能夠?qū)α姿峄鞍踪|(zhì)特異性吸附的新型硅球材料。通過(guò)傅里葉紅外光譜、透射電子顯微鏡對(duì)新型硅球材料SiO2@M2進(jìn)行表征，結(jié)果顯示新型硅球材料的直徑大約為210-220nm，其表面修飾有功能單體的聚合物層的厚度約為10nm。然后以經(jīng)典的磷酸化蛋白質(zhì)β一酪蛋白為模式蛋白來(lái)考察新型硅球材料SiO2@M2對(duì)于磷酸化蛋白質(zhì)的吸附性能

4、。研究結(jié)果表明，新型硅球材料SiO2@M2不僅對(duì)于β-酪蛋白這一種磷酸化蛋白質(zhì)具有較高吸附容量(對(duì)β-酪蛋白的吸附容量為92mg/g)，而且對(duì)于其它兩種磷酸化蛋白質(zhì)α-酪蛋白和雞卵白蛋白OVA均具有良好的吸附容量(對(duì)α-酪蛋白的吸附容量為40.2mg/g、對(duì)雞卵白蛋白OVA的吸附容量為36.3mg/g)，均高于其它非磷酸化蛋白質(zhì)的吸附容量（牛血清蛋白BSA的吸附容量為12.8mg/g、細(xì)胞色素C的吸附容量為6.28mg/g、牛血紅蛋白的