依諾肝素鈉原料藥穩(wěn)定性研究.pdf

1、低分子肝素(low-molecular-weightheparin，LMWH，平均Mr3000～7000)是由未分級肝素（unfractionatedheparin，UFH）經(jīng)物理分級得到的具有較低分子量的組分或經(jīng)化學(xué)方法或酶法降解得到的低分子量片段，具有與UFH相同的母體結(jié)構(gòu)，是一種高度硫酸化的糖胺聚糖。與普通肝素相比，具有更低的出血副作用、更可預(yù)見的藥理作用、更長的半衰期和更高皮下注射生物利用度，因而受到更多的關(guān)注，是近三十年發(fā)展起

2、來的新一代肝素類抗血栓藥物，目前已逐步取代肝素應(yīng)用于臨床。
　　 依諾肝素鈉是肝素經(jīng)堿性β-消除反應(yīng)制得的低分子肝素片段，是低分子肝素的一種，其系統(tǒng)化學(xué)名為2-硫酸基-α-L-艾杜糖醛酸-β-(1→4)-2-去氧-2-N-硫酸基-6-O-α-D-葡萄糖，其非還原末端為4-烯基-吡喃糖-葡萄醛酸內(nèi)酯，還原端有15％～25％的成分含有1，6-酐環(huán)狀結(jié)構(gòu)。平均分子量為3800～5000，小于2000含量為12.0％～20.0％，200

3、0～8000含量為68.0％～82.0％。抗FXa活性為90IU/mg～125IU/mg，抗FⅡa活性為20IU/mg～35IU/mg，抗FXa/抗FⅡa為3.3～5.3。硫酸根與羧基比不小于1.8。依諾肝素鈉的專利在2012年2月到期，在其獨占市場的17年間取得了巨大的成功，為超級重磅炸彈藥物。
　　 原料藥的穩(wěn)定性是指其保持物理、化學(xué)、生物學(xué)和微生物學(xué)特性的能力。穩(wěn)定性研究是基于對原料藥及其生產(chǎn)工藝的系統(tǒng)研究和理解，通過設(shè)計

4、試驗獲得原料藥的質(zhì)量特性在各種環(huán)境因素（如溫度、濕度、光線照射等）的影響下隨時間變化的規(guī)律，并據(jù)此為藥品的處方、工藝、包裝、貯藏條件和復(fù)驗期/有效期的確定提供支持性信息。本課題即開展國產(chǎn)仿制依諾肝素鈉穩(wěn)定性的研究，取得的主要成果如下:
　　 1、分析方法的建立與驗證
　　 本課題中部分分析方法參考了歐洲藥典中關(guān)于依諾肝素鈉和低分子肝素項下的方法，另有部分有自建方法或?qū)λ幍浞椒ㄟM(jìn)行優(yōu)化。課題中分別對分子量分析方法，抗Xa因

5、子活性、抗Ⅱa因子活性分析方法，游離根離子分析方法，高效毛細(xì)管電泳(CE)分析方法和1，6-酐環(huán)狀結(jié)構(gòu)分析方法進(jìn)行了驗證。
　　 2、穩(wěn)定性研究
　　 依據(jù)化學(xué)藥物（原料藥和制劑）穩(wěn)定性研究技術(shù)指導(dǎo)原則設(shè)計方案，開展了包括強降解試驗、影響因素試驗、加速穩(wěn)定性試驗和長期穩(wěn)定性試驗。
　　 強降解試驗表明依諾肝素鈉對強酸、強堿及強氧化較為敏感，其主要的反應(yīng)為糖苷鍵斷裂（分子量降低）、脫硫酸基、活性下降、光吸收增加;肝

6、素結(jié)構(gòu)中的O-硫酸基對堿性條件敏感，會脫落。即依諾肝素鈉主要的降解反應(yīng)為糖苷鍵斷裂、硫酸基脫落。
　　 影響因素試驗表明依諾肝素鈉能夠短暫承受光照，但應(yīng)盡量避免;對于高溫，則應(yīng)避免，以免樣品性狀發(fā)生改變，影響產(chǎn)品質(zhì)量。
　　 加速和長期穩(wěn)定性試驗表明依諾肝素鈉在有效期內(nèi)產(chǎn)品質(zhì)量非常穩(wěn)定，同時也證明了包材對藥物保護(hù)的有效性。但考慮到第四年的吸潮現(xiàn)象，產(chǎn)品不宜過期存放和使用。
　　 通過對上述幾方面的研究，初步確定了