烤煙調(diào)制變黃期新植二烯代謝初探.pdf

1、烘烤調(diào)制期是影響煙葉揮發(fā)性香氣物質(zhì)形成的重要階段。許多研究指出在烤煙揮發(fā)性香氣物質(zhì)中，萜類物質(zhì)新植二烯占總量的60-80％，是含量最高的一種;調(diào)制變黃期是新植二烯積累的主要時期。雖然早已有關(guān)于煙葉中新植二烯來源的推測，但至今未見相關(guān)實驗研究的具體報道。
　　為研究煙葉中新植二烯的來源，本研究以烤煙品種云煙87為供試材料，在煙葉調(diào)制變黃階段進行動態(tài)取樣，定量分析了煙葉的還原糖、葉綠素和新植二烯的含量，并測定了煙草萜類代謝途徑中重要基

2、因的表達狀況。主要研究結(jié)果如下:
　　1.在變黃期，烤煙葉片還原糖含量波動大，總體呈現(xiàn)先上升后下降的規(guī)律;在烘烤第40h和64h出現(xiàn)兩個高峰，在烘烤第48h-56h之間出現(xiàn)波谷;含量最高點出現(xiàn)在烘烤第64h，為干葉重的14.3％。
　　葉綠素在變黃期不同階段分解速度不同，體現(xiàn)出前期分解快、中期分解慢、中后期分解快、后期分解慢的規(guī)律;到變黃期結(jié)束時其含量已從烘烤前的1.6mg/g降低至0.1mg/g。
　　新植二烯含量總

3、體呈現(xiàn)波動上升趨勢，在烘烤第32h、56h出現(xiàn)兩個波峰，在烘烤40h、72h出現(xiàn)兩個波谷;到80h其含量由0.03mg/g增加到0.359mg/g。
　　2.對烘烤變黃期基因表達強度的研究應(yīng)該在烘烤開始后48h以內(nèi)進行。對DXR和GGPPS基因在25℃和38℃下的轉(zhuǎn)錄表達進行分析比較發(fā)現(xiàn)，在1h以內(nèi)38℃處理組表達量高于25℃組，4h以后38℃處理組表達量低于25℃組，說明高溫脅迫在1h以內(nèi)有利于兩基因表達，4h后會對兩基因表達產(chǎn)

4、生抑制;38℃條件下DXR基因表達量在12h時最高，GGPPS基因表達量在4h最高，說明高溫對兩基因表達的影響不同;25℃條件下兩基因表達量都在4h最高，但DXR基因表達量在4h之后降幅低于GGPPS基因，說明在常溫離體環(huán)境下兩基因表達的變化不同。
　　對烘烤變黃期烤煙葉中DXS、DXR、IspH、IPI、GGPPS、HMGR、MK和MDC這八個萜類物質(zhì)代謝酶對應(yīng)基因表達量進行動態(tài)測定，發(fā)現(xiàn)調(diào)制之前烤煙葉片中的MVA途徑和MEP途

5、徑表達量差異很大，前者約是后者的10倍;調(diào)制過程中MVA途徑相關(guān)基因表達量變化更為明顯，MEP途徑限速酶相關(guān)基因表達量相對穩(wěn)定。
　　3.通過對比不同時間點葉綠素與新植二烯的含量，發(fā)現(xiàn)兩者的變化規(guī)律不吻合;定量計算結(jié)果表明，葉綠素降解不能完全解釋新植二烯的產(chǎn)生原因。
　　新植二烯的含量變化規(guī)律與還原糖的含量變化規(guī)律有關(guān)，說明變黃期煙葉中的新植二烯可能有部分來源于萜類代謝MVA途徑或MEP途徑;灰色關(guān)聯(lián)度分析結(jié)果表明，MEP途