以海藻殘?jiān)鼮榘l(fā)酵底物乳桿菌增殖條件的研究.pdf

1、乳制品已成為人們?nèi)粘ｏ嬍持械闹匾M成部分，為了使乳制品具有不同的生理活性，通常在乳中加入乳酸菌，所以乳酸菌及適合乳酸菌生長的基礎(chǔ)培養(yǎng)基成為研究的熱點(diǎn)，適宜的基礎(chǔ)培養(yǎng)基應(yīng)該具有能夠提供菌體生長必需的營養(yǎng)成分、來源廣泛、價(jià)格低廉、細(xì)胞產(chǎn)率高等特點(diǎn)。利用海藻生產(chǎn)生物柴油后的廢棄物中含有大量的碳水化合物和蛋白質(zhì)，而且產(chǎn)量大，來源廣，價(jià)格低，所以選擇這種廉價(jià)又營養(yǎng)豐富的物質(zhì)作為乳酸菌發(fā)酵的底物，通過營養(yǎng)強(qiáng)化，改變發(fā)酵條件，以及酸解、酶解或者酸解酶

2、解共同作用處理海藻殘?jiān)?，從而促進(jìn)植物乳桿菌09004和保加利亞乳桿菌ATCC11842在海藻殘?jiān)械脑鲋场?br>　　對海藻殘?jiān)臓I養(yǎng)成分進(jìn)行分析，凱氏定氮法測得海藻殘?jiān)牡鞍踪|(zhì)含量為15.32％±0.22％;索氏抽提法測得粗脂肪的含量為36.6％±0.51％;高效液相色譜法測定糖組成，海藻糖含量為0.27％±0.04％、葡萄糖含量為0.08％±0.01％、半乳糖含量為0.06％±0.007％、阿拉伯糖含量為0.0085％±0.0007

3、％;氨基酸分析儀測定海藻殘?jiān)锌偘被岷繛?2.26％;直接滴定法測得淀粉含量為17.17％±0.05％。
　　保加利亞乳桿菌ATCC11842在37℃發(fā)酵MRS培養(yǎng)基，最大活菌數(shù)可以達(dá)到2.86×107CFU/mL，在37℃發(fā)酵2％(w/v)海藻殘?jiān)畲蠡罹鷶?shù)可以達(dá)到1.60×107CFU/mL。對海藻殘?jiān)囵B(yǎng)基進(jìn)行營養(yǎng)強(qiáng)化，分別研究在2％(w/v)海藻殘?jiān)刑砑?種維生素（泛酸、核黃素、生物素、鹽酸吡哆辛、煙酰胺），添加氨

4、基酸（胱氨酸、谷氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、色氨酸），添加葡萄糖（添加量為1％，2％，5％），添加蛋白胨（添加量為0.25％，0.5％，1％），通過生長曲線、pH變化、乳酸產(chǎn)量的對比，結(jié)果表明:添加維生素和氨基酸可以顯著促進(jìn)保加利亞乳桿菌ATCC11842的增殖(p＜0.05），顯著提高乳酸產(chǎn)量(p＜0.05）;添加1％(w/v)和2％(w/v)葡萄糖活菌數(shù)顯著高于添加4％(w/v)葡萄糖(p＜0.05)，添加2％(w/v)葡萄糖乳酸產(chǎn)量最

5、高，因此選擇2％(w/v)葡萄糖添加量與不同的蛋白胨添加量復(fù)配;添加0.5％(w/v)的蛋白胨活菌數(shù)顯著高于添加0.25％(w/v)和1％(w/v)蛋白胨(p＜0.05），添加0.5％(w/v)和1％(w/v)蛋白胨乳酸產(chǎn)量顯著高于添加0.25％(w/v)蛋白胨(p＜0.05）;然后用葡萄糖和蛋白胨復(fù)配，結(jié)果表明:1％(w/v)蛋白胨和2％(w/v)葡萄糖的復(fù)配添加量可以顯著促進(jìn)保加利亞乳桿菌ATCC11842的增殖(p＜0.05）。研

6、究不同的發(fā)酵溫度、不同的發(fā)酵酸度對保加利亞乳桿菌ATCC11842發(fā)酵海藻殘?jiān)挠绊懀Y(jié)果表明，37℃，pH=6.5最有利于保加利亞乳桿菌ATCC11842發(fā)酵海藻殘?jiān)?。?5％的偏磷酸水解，α-淀粉酶水解，以及偏磷酸和α-淀粉酶協(xié)同作用對海藻殘?jiān)M(jìn)行預(yù)處理，發(fā)現(xiàn)偏磷酸和α-淀粉酶協(xié)同作用最有利于促進(jìn)保加利亞乳桿菌ATCC11842發(fā)酵海藻殘?jiān)脑鲋场?br>　　植物乳桿菌09004在37℃發(fā)酵MRS培養(yǎng)基，最大活菌數(shù)可以達(dá)到2.56×

7、109CFU/mL，在37℃發(fā)酵2％(w/v)海藻殘?jiān)?，最大活菌?shù)是1.08×108CFU/mL。對海藻殘?jiān)囵B(yǎng)基進(jìn)行營養(yǎng)強(qiáng)化，分別研究在2％(w/v)海藻殘?jiān)刑砑?種維生素（泛酸、核黃素、生物素、鹽酸吡哆辛、煙酰胺），添加氨基酸（胱氨酸、谷氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、色氨酸），添加葡萄糖（添加量為1％，2％，5％），添加蛋白胨（添加量為0.25％，0.5％，1％），通過生長曲線、pH變化、乳酸產(chǎn)量的對比，結(jié)果表明:添加維生素和氨基酸可以

8、顯著促進(jìn)植物乳桿菌09004的增殖(p＜0.05），顯著提高乳酸產(chǎn)量(p＜0.05);添加2％(w/v)葡萄糖活菌數(shù)顯著高于添加1％(w/v)和4％(w/v)葡萄糖(p＜0.05），乳酸產(chǎn)量沒有顯著差異，因此選擇2％(w/v)葡萄糖添加量與不同的蛋白胨添加量復(fù)配;添加0.5％(w/v)的蛋白胨活菌數(shù)和乳酸產(chǎn)量都顯著高于添加0.25％(w/v)和1％(w/v)蛋白胨(p＜0.05）;然后用葡萄糖和蛋白胨復(fù)配，結(jié)果表明:1％(w/v)蛋白胨

9、和2％(w/v)葡萄糖的復(fù)配添加量可以顯著促進(jìn)植物乳桿菌09004的增殖(p＜0.05）。研究不同的發(fā)酵溫度、不同的發(fā)酵酸度對植物乳桿菌09004發(fā)酵海藻殘?jiān)挠绊?，結(jié)果表明:37℃，pH=6.5最有利于植物乳桿菌09004發(fā)酵海藻殘?jiān)?。?5％的偏磷酸水解，α-淀粉酶水解，以及偏磷酸和α-淀粉酶協(xié)同作用對海藻殘?jiān)M(jìn)行預(yù)處理，發(fā)現(xiàn)偏磷酸和α-淀粉酶協(xié)同作用最有利于促進(jìn)植物乳桿菌09004發(fā)酵海藻殘?jiān)脑鲋场?br>　　經(jīng)過以上的研究表明