雌激素影響STC-1細(xì)胞甜味信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的機(jī)制研究.pdf

1、本文利用目前常用的味覺(jué)研究工具——小鼠腸道內(nèi)分泌細(xì)胞株STC-1為研究對(duì)象，進(jìn)行體外細(xì)胞水平研究:本研究采用17β-雌二醇(E2)和甜味劑（蔗糖、安賽蜜糖）對(duì)STC-1細(xì)胞進(jìn)行干預(yù)，檢測(cè)胞內(nèi)Ca2+釋放量以及胞外ATP濃度的變化，并通過(guò)qRT-PCR觀(guān)察雌激素受體（ERα、ERβ和GPER）以及甜味信號(hào)傳導(dǎo)關(guān)鍵分子(T1R2/T1R3、Gα、PLCβ2和TRPM5)的mRNA表達(dá)情況，此外還利用Western blotting技術(shù)觀(guān)察甜

2、味信號(hào)蛋白（T1R2/T1R3、Gα、PLCβ2和TRPM5）表達(dá)情況。該研究旨在探討雌激素影響甜味信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的機(jī)制，為雌激素影響甜味感知能力、攝食行為和肥胖等研究提供更多的生物學(xué)依據(jù)。具體結(jié)論如下:
　　不同濃度甜味劑對(duì)STC-1細(xì)胞胞內(nèi)Ca2+和胞外ATP釋放的影響:發(fā)現(xiàn)胞內(nèi)Ca2+的濃度隨蔗糖濃度增加而升高，胞外ATP的濃度隨著甜味劑濃度的增加，蔗糖處理組有先升高后降低的趨勢(shì)，而AK糖處理組則是先增加后趨于平穩(wěn)。不同濃度雌激素

3、預(yù)處理12h，低濃度(1nM)雌激素對(duì)蔗糖誘導(dǎo)的胞內(nèi)Ca2+釋放沒(méi)有影響，而生理濃度(10nM)和高濃度(50nM)E2能顯著促進(jìn)胞內(nèi)Ca2+的釋放，且10nM E2能夠促進(jìn)蔗糖和AK糖誘導(dǎo)的胞外ATP的釋放。不同濃度雌激素預(yù)處理10min，50nM E2對(duì)蔗糖誘導(dǎo)胞內(nèi)Ca2+和胞外ATP的釋放均有促進(jìn)作用。
　　STC-1細(xì)胞雌激素受體表達(dá)的驗(yàn)證:結(jié)果顯示雌激素受體三種亞型均有表達(dá)，其中ERα和GPER的表達(dá)量較高。10nM雌激