多菌種固態(tài)發(fā)酵菜籽粕的工藝優(yōu)化及其對(duì)肉雞的飼用價(jià)值評(píng)定.pdf

1、本文旨在研究建立菜籽粕脫毒固態(tài)發(fā)酵工藝，提高菜籽粕飼用價(jià)值。在篩選出高效降解菜籽粕中硫甙的天然菌株基礎(chǔ)上，結(jié)合其他菌株，優(yōu)化建立菜籽粕的多菌種固態(tài)發(fā)酵工藝，評(píng)定其發(fā)酵前后的肉雞表觀代謝能及氨基酸回腸消化率，通過(guò)肉雞飼養(yǎng)試驗(yàn)驗(yàn)證其飼喂效果并確定適宜用量。全文共分為五個(gè)試驗(yàn)。
　　試驗(yàn)一、菜籽粕脫毒菌株的篩選
　　以菜籽粕中主要抗?fàn)I養(yǎng)因子硫甙(Glucosinolate，GS)為唯一碳源，從發(fā)酵青貯與土壤混合液中分離出54株在篩

2、選培養(yǎng)基上生長(zhǎng)情況良好的菌株進(jìn)行分離純化，并通過(guò)菜籽粕固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行單菌發(fā)酵試驗(yàn)，得到一株硫甙降解率達(dá)23.69％的菌株A9，對(duì)菌株A9進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察和16S rDNA序列測(cè)定與分析，確定菌株A9為嗜酸乳桿菌。將其與釀酒酵母、枯草芽孢桿菌進(jìn)行混菌發(fā)酵，發(fā)酵后的菜籽粕（干物質(zhì)基礎(chǔ)）硫甙含量由37.48umol/g降低到25.96umol/g，降解率為30.73％;同時(shí)蛋白結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，蛋白質(zhì)分子質(zhì)量變小，多肽含量由0.84％提高到2.

3、62％。總酸含量由1.01％提高到3.91％，菜籽粕的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值與風(fēng)味得到了有效的改善。
　　試驗(yàn)二、混菌固態(tài)發(fā)酵菜籽粕工藝優(yōu)化
　　通過(guò)正交設(shè)計(jì)優(yōu)化菜籽粕混菌固態(tài)發(fā)酵工藝，提高菜籽粕的飼用價(jià)值。采用嗜酸乳桿菌、枯草芽孢桿菌、釀酒酵母3株菌種，以硫甙降解率(X％)、總酸增加率(Y％)、多肽增加率(Z％)為評(píng)價(jià)指標(biāo)，并采用加權(quán)法以M為綜合評(píng)價(jià)指標(biāo)（其中M=0.7*X+0.15*Y+0.15*Z），以三株菌不同的添加比例為試驗(yàn)因素

4、，設(shè)計(jì)L9(34)三因素三水平正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)，探究混菌固態(tài)發(fā)酵菜籽粕最佳混菌比例;以發(fā)酵溫度、料水比、時(shí)間、接種量為試驗(yàn)因素，設(shè)計(jì)L16(45)四因素四水平正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)，探究混菌固態(tài)發(fā)酵菜籽粕的最佳工藝。結(jié)果表明:1）混菌固態(tài)發(fā)酵菜籽粕最佳混菌比例為嗜酸乳桿菌∶枯草芽孢桿菌∶釀酒酵母=1∶3∶2;2）混菌固態(tài)發(fā)酵菜籽粕的最佳條件為發(fā)酵溫度33℃，發(fā)酵時(shí)間84h，料水比1∶1，接種量6％。
　　試驗(yàn)三、發(fā)酵菜籽粕對(duì)肉雞表觀代謝能的影響

5、
　　本試驗(yàn)選用72只成年AA肉公雞，按初始體重?zé)o差異原則隨機(jī)分為3個(gè)處理，每個(gè)處理6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)4只雞。結(jié)果顯示發(fā)酵后菜籽粕的表觀消化能顯著升高(P＜0.05)，發(fā)酵后菜籽粕表觀消化能由7.41MJ/kg升高到851MJ/kg。
　　試驗(yàn)四、發(fā)酵菜籽粕對(duì)肉雞氨基酸表觀回腸消化率和標(biāo)準(zhǔn)回腸消化率的影響
　　本試驗(yàn)選用72只成年AA肉公雞，按初始體重?zé)o差異原則隨機(jī)分為3個(gè)處理，每個(gè)處理6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)4只雞。結(jié)果顯

6、示發(fā)酵后菜籽粕各氨基酸消化率均有不同程度的提高，其中精氨酸、賴氨酸、酪氨酸、亮氨酸、異亮氨酸的表觀回腸消化率與標(biāo)準(zhǔn)回腸消化率顯著高于未發(fā)酵處理組(P＜0.05)，其他氨基酸消化率無(wú)顯著差異（P＞0.05）。
　　試驗(yàn)五、發(fā)酵菜籽粕對(duì)肉雞生長(zhǎng)和屠宰性能、免疫功能和腸道發(fā)育的影響
　　本試驗(yàn)選用420只1日齡AA肉仔公雞，隨機(jī)分為7個(gè)處理，每個(gè)處理6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只雞。以玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧為對(duì)照，發(fā)酵菜籽粕和未發(fā)酵菜籽粕

7、均設(shè)置5％、10％和15％三個(gè)添加梯度。結(jié)果顯示發(fā)酵菜籽粕能不同程度的提高肉雞生產(chǎn)性能，能顯著提高肉雞屠宰率、全凈膛率并降低腹脂率（P＜0.05），效果優(yōu)于未發(fā)酵菜籽粕各處理組;發(fā)酵菜籽粕能顯著提高肉雞脾臟指數(shù)(P＜0.05)，提高肉雞十二指腸和空腸的V/C值(P＞0.05)。發(fā)酵菜籽粕能夠替代肉雞日糧中的豆粕，其中15％的發(fā)酵菜籽粕與不添加菜籽粕的生產(chǎn)性能與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P＞0.05)，10％的發(fā)酵菜籽粕生產(chǎn)性能、免疫指標(biāo)、腸道發(fā)