用于線粒體微環(huán)境參數(shù)響應的熒光染料研究.pdf

1、對細胞器的研究一直是認識細胞結構和功能的重要方法，線粒體作為細胞的能量工廠，參與眾多的新陳代謝過程，許多病理學過程均與它相關，一直以來都是研究的熱點。雖然目前已報道許多線粒體相關的熒光染料，但是大部分只能應用于線粒體內金屬離子、活性氧物種、有機小分子或酸堿環(huán)境的響應，而對于線粒體內黏度或極性響應的熒光染料未見報道，是生物學研究的薄弱領域，因此，設計合成線粒體黏度或極性響應的熒光染料對深入探索線粒體在生物過程的細節(jié)作用具有重要意義。

2、>　　1.將苯基引入到氟硼吡咯(BODIPY)染料的3，5-位，噻唑環(huán)引入到1，7-位，8-位引入吡啶基，合成染料DPT，對中位吡啶氮原子甲基季銨化，得到最終產品M-DPT。通過測試光譜性質得知，這兩例熒光染料的發(fā)射波長均處于近紅外光區(qū)(λem, DPT=655nm和λem,M-DPT=718 nm)，特別是M-DPT，在吡啶季銨化后，染料的最大發(fā)射波長紅移到長波長區(qū)域，斯托克斯位移增大到48 nm，熒光發(fā)射光譜不受溶劑和pH值變化的影

3、響，通過理論計算解釋了波長紅移和斯托克斯位移增大的現(xiàn)象。同時，M-DPT具有活細胞通透性，可對線粒體進行特異性染色和成像。
　　2.通過對中位醛基取代的五甲川菁染料母體進行芐基季銨化得到染料Mito-V。該染料具有兩個最大吸收（410nm和610nm）和發(fā)射峰（456 nm和665 nm），隨著溶液黏度增加，兩個熒光發(fā)射強度增加幅度不一致，且長波長與短波長處熒光比率的對數(shù)值，或長波長處熒光壽命的對數(shù)值，均與黏度對數(shù)值之間成良好的線

4、性關系(R2=0.992和0.998)。Mito-V具有活細胞通透性，可通過比率熒光和熒光壽命成像兩種方法監(jiān)測線粒體黏度變化。
　　3.將香豆素和芐基季銨化后的苯并噻唑基團通過共軛連接得到染料BOB。該染料具有兩個吸收最大吸收（426nm和561nm）和發(fā)射峰（467nm和645 nm），隨著溶液極性增加，短波長與長波長處熒光強度的比值，與溶液極性值呈良好的線性關系(R2=0.93)，可通過比率熒光測試溶液極性。BOB具有活細胞通