三種藥用植物的化學(xué)成分和活性分子去氫木香烴內(nèi)酯誘導(dǎo)HeLa細(xì)胞凋亡機制的研究.pdf

1、藥用植物的化學(xué)成分具有結(jié)構(gòu)多樣、生物活性豐富且不易耐藥的特點。中國藥用植物的種類多達(dá)上萬余種，這為從藥用植物的化學(xué)成分中發(fā)現(xiàn)藥理活性顯著的天然分子，繼而將其發(fā)展為創(chuàng)新藥物創(chuàng)造了有利的條件。對藥用植物化學(xué)成分的研究有利于推動中國中藥的發(fā)展和傳播，也是國際藥學(xué)領(lǐng)域關(guān)注的研究方向之一。
　　生物堿和萜類化合物是兩類非常重要的天然產(chǎn)物，它們廣泛地存在于各種藥用植物中，是天然產(chǎn)物化學(xué)十分活躍的研究領(lǐng)域。它們的骨架龐雜、類型繁多、結(jié)構(gòu)千變?nèi)f化

2、。Cordell G.A等人于2001年就已經(jīng)報道，來源于天然界的生物堿約有30000多個，而從植物中分離得到的生物堿約有20000多個包括1900多種骨架，可見植物是生物堿的重要來源。萜類是植物揮發(fā)油的主要成分，據(jù)不完全統(tǒng)計，目前發(fā)現(xiàn)的此類化合物約有23000多個。生物堿和萜類化合物的生物活性也很豐富。長春新堿、秋水仙堿、紫杉醇、青蒿素等著名藥物的發(fā)現(xiàn)使這兩類化合物成為藥理學(xué)、合成學(xué)、天然產(chǎn)物領(lǐng)域研究的熱點。
　　本論文以富含生

3、物堿的夾竹桃科藥用植物盆架樹屬盆架樹（Winchia calophyllaA.DC.）和富含萜類的兩種菊科藥用植物橐吾屬掌葉橐吾（Ligularia przewalskii（Maxim.）Diels）、千里光屬Senecio destomtanii為研究對象，對它們的化學(xué)成分進(jìn)行了研究，并進(jìn)行了相關(guān)的生物活性測試，以期從這兩類化合物中發(fā)現(xiàn)質(zhì)優(yōu)低毒的藥物先導(dǎo)分子。同時，研究了菊科藥用植物風(fēng)毛菊屬云木香（Saussurea lappa C.

4、B.Clarke）中具有生物活性的倍半萜內(nèi)酯類化合物去氫木香烴內(nèi)酯（DHC）對宮頸癌細(xì)胞HeLa的抑制作用和作用機理，為DHC在抗癌領(lǐng)域的應(yīng)用提供了參考。
　　利用多種常規(guī)分離技術(shù)和方法（硅膠柱層析、重結(jié)晶等），結(jié)合高效液相色譜（HPLC），從上述藥用植物中分離得到了102個化合物，采用波譜分析（HRESIMS、UV、1H NMR、13C NMR、1H-1H COSY、DEPT135、HSQC、HMBC、NOESY、CD）和文獻(xiàn)對

5、照的方法，鑒定了它們的結(jié)構(gòu)，分別為30個吲哚類生物堿、12個倍半萜、10個三萜、12個甾體、5個黃酮、6個香豆素類化合物、24個苯的衍生物、3個長鏈類脂肪族化合物，其中有2個新化合物（Wc3、Wc8），均從盆架樹中分離得到，分別為akuammiline型和vincorine型的生物堿。本論文首次報道了盆架樹中sarpagine型生物堿（Wc27）的存在和S.destomtanii的化學(xué)成分。
　　測試了量多的化合物的抗植物病原真菌

6、活性。其中吲哚類生物堿Wc2、7、10和11表現(xiàn)出了顯著的抗植物病原真菌活性，并且具有廣譜的抑菌作用。Wc2對P.italicum的抑制IC50值為10μM，Wc2抑制Fusarium oxysporumf.spcubenis(香蕉枯萎病菌)的IC50值為11μM，Wc7抑制Rhizoctonia solani(辣椒立枯絲核病菌)的IC50值也為11μM，均好于甲基托布津（陽性對照藥物）的作用。此外，從S.destomtanii中分離得

7、到的三萜Sd4、Sd6和從L.przewalskii中分離得到的倍半萜衍生物L(fēng)p1、三萜Lp12也顯示了中等程度的抗植物病原真菌活性。還測試了部分生物堿的抗乙酰膽堿酯酶活性和細(xì)胞毒活性，結(jié)果顯示這些生物堿的抗乙酰膽堿酯酶活性和細(xì)胞毒活性都不明顯。
　　據(jù)文獻(xiàn)報道，DHC對肝癌細(xì)胞、肺癌細(xì)胞、卵巢癌細(xì)胞、宮頸癌細(xì)胞等多種腫瘤細(xì)胞均表現(xiàn)出較強的抑制作用，但對其機理的研究尚不完善。因此，本論文對從菊科植物云木香中提取得到的DHC誘導(dǎo)宮頸

8、癌細(xì)胞HeLa的凋亡機制進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)DHC可以降低HeLa細(xì)胞中硫氧還蛋白還原酶（TrxR1）的活性，使得細(xì)胞中的活性氧（ROS）累積，從而導(dǎo)致氧化應(yīng)激，最終誘導(dǎo)HeLa細(xì)胞凋亡。此外，DHC也可引起HeLa細(xì)胞內(nèi)硫醇含量的降低，導(dǎo)致氧化應(yīng)激的發(fā)生。
　　本論文綜述了DHC在抗癌、抗炎、抑菌等生物活性方面的應(yīng)用和相關(guān)機理，為DHC在發(fā)展新藥方面提供了較為可靠的依據(jù)，也為研究其它具有相似生物活性的化合物的作用機制提供了參考。