實時熒光環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增技術(shù)檢測牛奶中志賀氏菌的研究.pdf

1、三聚氰胺是一種有機(jī)化工原料，主要用于生產(chǎn)三聚氰胺甲醛樹脂。因為結(jié)構(gòu)中含有大量的氮元素，使用一般常量凱氏定氮法檢測乳制品及飼料中的蛋白質(zhì)含量無法識別這種偽蛋白氮的干擾，不法廠家抓住這一檢測缺陷，在部分嬰幼兒奶粉及飼料中非法添加三聚氰胺，導(dǎo)致一系列安全問題的發(fā)生。乳制品是兒童和老人的主要營養(yǎng)品，飼料是動物營養(yǎng)物質(zhì)的來源，為了保證這幾類食品的安全，建立一種快速、準(zhǔn)確、可靠的三聚氰胺分析方法是必要的。
　　本文分為兩大部分，一部分是探究高

2、效液相色譜法檢測乳制品和飼料中的三聚氰胺;另一部分是利用GC-MS法對乳制品和飼料中的三聚氰胺進(jìn)行定性定量檢測。具體內(nèi)容如下:
　　1.建立了一種既能測定乳制品又能測定飼料中三聚氰胺的高效液相色譜法。結(jié)果表明:采用1％三氯乙酸溶液作為乳制品及飼料樣品中三聚氰胺的提取劑提取效果較好;經(jīng)試驗驗證乙腈是乳制品和飼料類樣品的最優(yōu)蛋白沉淀劑，沉淀液經(jīng)SCX強(qiáng)陽離子固相萃取柱凈化，用冰乙酸調(diào)流動相pH值為3進(jìn)高效液相色譜法(HPLC)測定，外

3、標(biāo)法定量。三聚氰胺在試驗0.5～200mg/L濃度范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，其相關(guān)系數(shù)為0.9986，RSD在5％以下，加標(biāo)回收率高于90％。本方法操作方便，具有較高的精密度和準(zhǔn)確度，比較適合用作乳制品及飼料中三聚氰胺的定量分析。
　　2.建立了一種衍生化氣相色譜法快速檢測乳制品及飼料中三聚氰胺的檢測方法，并對衍生條件進(jìn)行優(yōu)化。樣品經(jīng)過提取溶劑超聲提取，以不低于4000r/min轉(zhuǎn)速離心10min，上清液過固相萃取柱凈化，收集洗脫

4、液在50℃水浴中氮?dú)獯蹈?，用BSTFA+1％TMCS衍生劑和吡啶回溶，在微波功率800 W條件下衍生120s，最后過0.45μm微孔濾膜，供GC-MS檢測分析。結(jié)果表明，當(dāng)衍生劑用量為200μL，吡啶用量為400μL，微波功率800W，微波處理時間120s的條件下，所得到的樣品處理效果最好。用該方法檢測乳制品及飼料中三聚氰胺加標(biāo)回收率較高，四種樣品的加標(biāo)回收率均高于96.9％，RSD均小于5.1％，并且在加標(biāo)濃度范圍內(nèi)，具有較好的線性關(guān)