基于萊菔素的現(xiàn)代五類中藥的制備及其藥理毒理初步研究.pdf

1、蘿卜是一種常見的十字花科植物，蘿卜根莖和芽苗是人們日常大量食用的蔬菜，蘿卜籽可入藥，中藥名稱為萊菔子。作為一種十字花科植物，蘿卜中含有大量的黑芥子酶及蘿卜硫苷，蘿卜組織破損后，黑芥子酶與蘿卜硫苷充分接觸，酶解蘿卜硫苷轉化生成萊菔素。作為一種異硫氰酸酯，萊菔素可高效誘導Ⅱ相解毒酶，提高人體對致癌物的清除能力，并能夠有效抑制癌細胞的生長增殖和殺死癌細胞。本文主要研究萊菔素粗提物的分離制各工藝，萊菔素粗提物的急性毒性，以及萊菔素粗提物的體內外

2、抗癌活性。
　　采用富含蘿卜硫苷和黑芥子酶的蘿卜籽作為原料，建立了高效的萊菔素粗提物分離制備工藝。研究表明，熱壓榨預處理可消除水解反應體系中的硫化氫，有效避免新生成的萊菔素發(fā)生快速降解，從而實現(xiàn)水解反應體系中萊菔素的有效積累。維生素C可有效還原黑芥子酶分子中的巰基，從而高效的激活黑芥子酶，提高萊菔素的生成速率。萊菔素的生成速率隨溫度的降低而顯著升高，低溫有利于萊菔素的酶解生成。黑芥子酶催化蘿卜硫苷水解反應的最適pH值是5.0，且有

3、利于酶解反應體系中萊菔素的高效積累。SP-850樹脂可快速吸附富集酶解液中的萊菔素，80％乙醇溶液可有效洗脫SP-850樹脂中吸附的萊菔素，再通過二氯甲烷萃取萊菔素濃縮液，可獲得高含量的萊菔素粗提物。最優(yōu)分離條件下，萊菔素粗提物產量為9.25 g·kg-1，產品中萊菔素含量為81.5％，分離制備工藝總體收率為88.3％。
　　體外抗癌活性研究表明，萊菔素粗提物可劑量依賴性地抑制NCI-H460、A549、SK-OV-3、Hela、

4、HepG2、MDA453、MCF-7、 A375、BxPC-3和LNCaP癌細胞的體外生長增殖，半數(shù)抑制濃度依次為3.22μg·mL-1、7.38μg·mL-1、7.16μg·mL-1、3.92μg·mL-1、4.92μg·mL-1、6.33μg·mL-1、5.84μg·mL-1、0.964μg·mL-1、3.65μg·mL-1和6.71μg·mL-1。A375癌細胞對萊菔素粗提物最敏感，其半數(shù)抑制濃度比其它癌細胞普遍低3～8倍。急性毒

5、性實驗表明，萊菔素粗提物對實驗小鼠的半數(shù)致死量為186.8 mg·kg-1，證實萊菔素粗提物對實驗小鼠具有中等毒性。實驗小鼠死亡的主要原因可能是萊菔素粗提物對實驗小鼠中樞神經系統(tǒng)的強興奮作用，且萊菔素粗提物對實驗小鼠的胃腸道組織具有一定的致?lián)p傷作用。研究評價了萊菔素粗提物的體內抗癌活性。實驗研究表明，在50 mg· kg-1到250 mg·kg-1 BID劑量下，萊菔素粗提物對A375癌細胞移植瘤生長無明顯抑制作用。實驗小鼠體內可能具有