ACAPE衍生物對大鼠心肌I-RI的保護(hù)作用研究.pdf

1、心血管疾病是人類常見、多發(fā)性疾病，所致死亡人數(shù)約占人類死亡人數(shù)的40％，儼然已成為人類死亡的主要原因。隨著心肌梗死發(fā)病率的逐年提高，以及冠狀動脈內(nèi)擴(kuò)張術(shù)、搭橋術(shù)、溶栓術(shù)、心臟外科體循環(huán)、器官移植等技術(shù)的建立和廣泛開展，心肌恢復(fù)血流后，因缺血所致的心肌功能受損、心肌細(xì)胞能量代謝障礙，以及細(xì)胞結(jié)構(gòu)受損進(jìn)一步加劇。臨床主要有血壓降低、心率失常、心肌頓抑、心功能不全甚至猝死等現(xiàn)象。因此，心肌缺血再灌注損傷對人類健康的威脅不容忽視，為此研發(fā)生物活

2、性高、毒副作用低，對缺血再灌注所致心肌損傷具有保護(hù)作用的物質(zhì)具有重要意義！
　　 心肌缺血再灌注損傷過程尤為復(fù)雜，其機(jī)制可能與下列因素有關(guān):①氧化應(yīng)激:導(dǎo)致細(xì)胞膜氧化受損，蛋白酶失活;②炎癥反應(yīng):缺血缺氧導(dǎo)致炎癥因子表達(dá)增加，出現(xiàn)中性粒細(xì)胞粘附、趨化，造成微血管的收縮堵塞，引起心肌細(xì)胞凋亡;③細(xì)胞內(nèi)Ca2+超載:胞內(nèi)鈣離子濃度過高導(dǎo)致細(xì)胞功能和結(jié)構(gòu)受損;④心室重構(gòu)⑤線粒體受損:引起能量代謝障礙，組織內(nèi)電解質(zhì)紊亂。因此，從以上幾種

3、潛在機(jī)制入手為研發(fā)抗心肌缺血再灌注損傷的藥物提供可能。
　　 咖啡酸苯乙酯（Caffeicacidphenethylester;CAPE），是蜂膠中的主要活性成分，具有鄰二酚羥基結(jié)構(gòu)，為黃酮類化合物，有著廣泛的生物活性，如:抗炎、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)、抗缺血再灌注損傷、清除自由基、抗腫瘤等。
　　 本課題組通過對咖啡酸苯乙酯結(jié)構(gòu)進(jìn)行了修飾改造，篩選得到了更具生物活性的咖啡酸苯乙酯衍生物:對硝基咖啡酸苯乙酯(CAPE-NO2)

4、和對羥基咖啡酸苯乙酯(CAPE-OH)。
　　 本研究以SD大鼠為研究對象，通過對大鼠心肌左冠狀動脈前降支的結(jié)扎建立心臟缺血再灌注在體模型，模擬心肌梗死后再灌注的病理生理變化。通過咖啡酸苯乙酯衍生物靜脈注射進(jìn)行干預(yù)，觀察大鼠心率變化情況，通過采血、離心檢測血清中的乳酸脫氫酶(LDH)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、肌酸激酶(CK)的活性或含量;通過對心肌組織的勻漿，檢測組織中的丙二醛(MDA)的含量，髓過氧化物酶(MPO)的活性;通過T

5、TC法染色，觀察心肌組織的梗死面積;通過免疫組化，檢測大鼠心肌細(xì)胞間粘附分子-1(ICAM-1)的表達(dá)情況。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:同假手術(shù)組（SHAM組）相比較血再灌注模型組（Control組）梗死面積率（35.6±5.4％）顯著增加(p＜0.05);CAPE及衍生物各組與Control組比較，CAPE、CAPE-NO2、CAPE-OH三組梗死面積均降低且具有顯著性差異(p＜0.05);CAPE-OH、CAPE-NO2兩組同CA

6、PE組比較，CAPE-NO2組梗死面積顯著下降，具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。
　　 心肌組織MPO的含量:同SHAM（1.1±0.19nmol/mg）組相比Control組（4.2±0.26nmol/mg）MDA表達(dá)含量明顯增加;同Control組相比較，CAPE、CAPE-NO2、CAPE-OH三組MDA含量均降低且有顯著性差異(p＜0.05)，衍生物組較CAPE組相比只有CAPE-NO2組MDA含量更低有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

7、p＜0.05)，但同SHAM組相比CAPE-NO2組MDA含量仍然很高。
　　 心肌酶的表達(dá)含量:同SHAM組相比，Control組各項(xiàng)心肌酶檢測指標(biāo)的表達(dá)均顯著增加，有顯著性差異(p＜0.05);CAPE、CAPE-NO2、CAPE-OH三組較control組相比均呈顯著降低趨勢，其中CAPE-NO2組下降程度最為明顯，但同SHAM相比仍然很高。
　　 心肌組織中ICAM-1的表達(dá):同SHAM組相比，control組I