紫娟綠茶中羥基肉桂酰酯型兒茶素的研究.pdf

1、茶葉中含有豐富的兒茶素類化合物，大約占茶葉干重的12％-24％。隨著對茶葉化學(xué)成分研究的深入，在茶葉中發(fā)現(xiàn)了多種特殊類型的兒茶素及其衍生物。研究表明兒茶素類化合物在抗癌、抗氧化、抗腫瘤等多個(gè)方面均有顯著功效。因此探究茶葉中特殊類型的兒茶素及其衍生物，并對其進(jìn)行分離鑒定、活性研究等是非常有必要的。通過研究茶葉中兒茶素類化合物及其生物活性可以為茶葉的綜合利用提供物質(zhì)基礎(chǔ)。此外，進(jìn)行相關(guān)化合物的生物合成研究，不僅能夠加深對兒茶素類化合物在茶葉

2、中的次生代謝途徑的認(rèn)識(shí)，還為相關(guān)化合物的應(yīng)用提供可替代的新途徑。
　　紫娟綠茶以其獨(dú)特的顏色、香氣及口感而聞名。目前，關(guān)于紫娟綠茶的化學(xué)成分研究相對較少。前期研究結(jié)果表明紫娟綠茶中顯著高含量的花青素是其呈紫色的重要原因，此外紫娟綠茶中還含有一些常見的兒茶素、生物堿等。特別的，在紫娟綠茶中還發(fā)現(xiàn)了一種羥基肉桂酰酯型兒茶素。那么紫娟綠茶中是否含有類似結(jié)構(gòu)的其它兒茶素或者是兒茶素衍生物，這些化合物是如何形成的以及具有哪些健康作用，這些問

3、題都需要對紫娟綠茶化學(xué)成分進(jìn)行深入研究后才能得到定論。
　　本實(shí)驗(yàn)以紫娟綠茶作為原料，粉碎后采用不同有機(jī)試劑（分別為石油醚、乙酸乙酯及甲醇）依次對其進(jìn)行超聲浸提。通過采用MCI、Sephadex LH-20凝膠、聚酰胺、HPLC等柱層析技術(shù)并借助ESI-HR-MS技術(shù)跟蹤指導(dǎo)對紫娟綠茶中目標(biāo)化合物進(jìn)行分離純化，結(jié)合多種現(xiàn)代波譜學(xué)方法（如核磁共振、質(zhì)譜、紅外及圓二色譜等）鑒定了3個(gè)羥基肉桂酰酯型兒茶素，分別為:表兒茶素反式咖啡酸酯(

4、1)，表沒食子兒茶素反式對香豆酸酯(2)和表沒食子兒茶素（3"-甲氧基）-反式對香豆酸酯(3)。其中化合物1是首次在茶葉中發(fā)現(xiàn)，化合物2是首次在紫娟綠茶中發(fā)現(xiàn)。
　　本實(shí)驗(yàn)采用酶催化合成方法研究了表兒茶素反式咖啡酸酯(1)在茶葉中的生物合成路徑，證明催化合成步驟涉及以下兩步:(Ⅰ)咖啡酸在沒食子葡萄糖苷轉(zhuǎn)移酶（galloyl-1-O-β-D-glucosyltransferase，UGGT）的催化下與UDP-glucose發(fā)生反應(yīng)

5、生成caffeoyl-β-D-glucose;(Ⅱ)表兒茶素(EC)在茶鮮葉提取粗酶的催化下與caffeoyl-β-D-glucose發(fā)生反應(yīng)生成表兒茶素反式咖啡酸酯。
　　采用分子對接技術(shù)對茶葉中發(fā)現(xiàn)的苯丙素類兒茶素與乙酰膽堿酯酶的結(jié)合進(jìn)行模擬實(shí)驗(yàn)，并對在紫娟綠茶中分離得到的三種羥基肉桂酰酯型兒茶素對乙酰膽堿酯酶活性的抑制作用進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。分子對接實(shí)驗(yàn)的結(jié)果顯示，在紫娟綠茶中分離得到的三種酯型兒茶素和部分其它苯丙素類兒茶素能夠