二甲雙胍對(duì)3T3-L1脂肪細(xì)胞v-SNAREs表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　觀察在3T3-L1脂肪細(xì)胞由不同濃度二甲雙胍干預(yù)后，對(duì)AMPK表達(dá)、GLUT4轉(zhuǎn)運(yùn)和囊泡相關(guān)可溶性N-乙酰基亞胺敏感因子附著蛋白受體家族成員 VAMP1、VA MP2、VAMP3、VAMP4、VAMP5、VAMP7、VAMP8表達(dá)變化的影響。
　　方法：
　　1.3T3-L1小鼠成纖維細(xì)胞于37℃，二氧化碳含量5％的環(huán)境下培養(yǎng)，經(jīng)誘導(dǎo)液誘導(dǎo)分化成為成熟脂肪細(xì)胞，油紅O方法鑒定。
　　2.不同濃度二甲雙

2、胍（0mmol/L、0.5mmol/L、1mmol/L、2mmol/L）干預(yù)后，運(yùn)用R T-PCR技術(shù)對(duì)細(xì)胞GLUT4，VAMP1、2、3、4、5、7、8的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。
　　3.運(yùn)用SPSS13.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）的形式將研究所得結(jié)果進(jìn)行表示，采用方差分析討論不同干預(yù)措施對(duì)AMPK、GLUT4、VAMP1、VAMP2、VAMP3、VAMP4、VAMP5、VAMP7、VAMP8表達(dá)的影響，各組間研

3、究結(jié)果差異應(yīng)用LSD法，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1.將3T3-L1前脂肪細(xì)胞用誘導(dǎo)液成功的誘導(dǎo)分化為成熟脂肪細(xì)胞。
　　2. RT-PCR結(jié)果：1）AMPK、GLUT4 RT-PCR數(shù)據(jù)顯示，與對(duì)照組比較結(jié)果和組間比較結(jié)果，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），隨二甲雙胍濃度增加，AMPK、GLUT4表達(dá)上調(diào)，呈劑量濃度相關(guān)性。2）VAMP1、VAMP2、VAMP3、VAMP4、VAMP5、VA

4、MP7、VAMP8 RT-PCR結(jié)果顯示，VAMP2、VAMP3、VAMP8與對(duì)照組比較及組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），隨二甲雙胍濃度增加，VAMP2、VAMP3、VAMP8表達(dá)上調(diào)，呈劑量相關(guān)性。隨二甲雙胍濃度增加，VAMP1、VAMP4、VAM P5、VAMP7的表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。
　　結(jié)論:
　　二甲雙胍能夠上調(diào) VAMP2、3、8的表達(dá)，與此同時(shí)有一定的濃度依賴效應(yīng)，對(duì)VAMP1、4、5