C3aRA、C5aRA對(duì)IgA1刺激的人腎小球系膜細(xì)胞增殖及IL-6、MCP-1表達(dá)的影響.pdf

1、目的：利用IgA1分子刺激人腎小球系膜細(xì)胞，觀察補(bǔ)體C3a、C5a受體拮抗劑（C3aRA、C5aRA）對(duì)其增殖及炎癥因子 IL-6、MCP-1表達(dá)的影響，以進(jìn)一步了解補(bǔ)體參與IgA腎病的作用機(jī)制。
　　方法：⑴利用MTT法檢測(cè)IgA1在不同濃度及孵育時(shí)間對(duì)人腎小球系膜細(xì)胞（HMCs）增殖的影響。⑵將HMCs分為四組（空白對(duì)照組、IgA1組、IgA1+C3aRA組、IgA1+C5aRA組），MTT法檢測(cè)C3aRA、C5aRA對(duì)IgA

2、1刺激的HMCs增殖的影響；熒光定量PCR（RT-qPCR）、Western blot檢測(cè)各組細(xì)胞C3aR、C5aR mRNA及蛋白表達(dá)情況。⑶將HMCs分為兩大組：第一組（空白對(duì)照組、C3a組、IgA1+C3a組、IgA1+C3a+C3aRA組）和第二組（空白對(duì)照組、C5a組、IgA1+C5a組、IgA1+C5a+C5aRA組），RT-qPCR、Western blot檢測(cè)各組細(xì)胞IL-6、MCP-1 mRNA及蛋白表達(dá)情況。

3、　　結(jié)果：①M(fèi)TT結(jié)果顯示：不同濃度的IgA1對(duì) HMCs增殖作用的影響不同，10μg/mL-100mg/mL的IgA1均可以刺激 HMCs的增殖，其中以1mg/mL和100μg/mL IgA1對(duì)HMCs增殖的刺激作用最強(qiáng)（P＜0.001）；100μg/mL IgA1刺激HMCs不同時(shí)間（6-48h）后其增殖均可出現(xiàn)增強(qiáng)，其中24h時(shí)對(duì)HMCs增殖的刺激作用最為明顯（P＜0.001）。②MTT結(jié)果顯示：與對(duì)照組相比，IgA1組細(xì)胞增殖明

4、顯增強(qiáng)（P＜0.001），而在分別給予C3aRA、C5aRA干預(yù)后，C3aRA組和C5aRA組細(xì)胞的生長增殖受到一定程度的抑制（P＜0.05）；RT-qPCR與Western blot結(jié)果顯示：IgA1上調(diào)HMCs C3aR、C5aR mRNA與蛋白表達(dá)（P＜0.001），而在分別給予C3aRA、C5aRA干預(yù)后，HMCs C3aR、C5aR mRNA及蛋白表達(dá)明顯減少（P＜0.05）。③RT-qPCR與 Western blot結(jié)果顯

5、示：IgA1、C3a、C5a可以刺激HMCs IL-6、MCP-1 mRNA與蛋白的表達(dá)，但作用較弱（P＜0.05），IgA1與C3a、C5a分別共同作用對(duì)HMCs IL-6、MCP-1 mRNA與蛋白表達(dá)的刺激作用較強(qiáng)（P＜0.05），C3aRA、C5aRA可以減弱IgA1與C3a、C5a對(duì)HMCs IL-6、MCP-1 mRNA與蛋白表達(dá)的刺激作用（P＜0.05）。
　　結(jié)論：⑴IgA1可刺激HMCs的增殖，且其增殖作用可被