RAF-1活化在MAPK和PI3K信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路調(diào)控胰腺癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制.pdf

1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文R A F ．1 活化在M A P K 和P 1 3 K 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路調(diào)控胰腺癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制T h e m o l e c u l a r m e c h a n i s m o f r e g u l a t i n g p a n c r e a t i cc a n c e r c e l l si n v a s i o na n d m e t a s t a s i

2、so f A c t i v a t e d R A F 一1i nM A P K a n d P 1 3 Ks i g n a l i n g p a t h w a y論文作者 ±監(jiān)堡 指導(dǎo)教師 堡壁壘塾撞申請(qǐng)學(xué)位 匡鱟亟± 培養(yǎng)單位 箜三墮盎芏墮一級(jí)學(xué)科 墮盎匿芏 二級(jí)學(xué)科 皇E 型芏論文起止時(shí)間 2 Q ! 壘生2 旦二至Q 】Z 生至旦中國(guó)醫(yī)科大學(xué)( 遼寧)2 0 1 7 年2 月中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文摘

3、要目的：胰腺癌是一種致死率極高的惡性腫瘤，預(yù)后極差，疾病進(jìn)展迅速，缺乏臨床癥狀特異性，總體5 年生存率不足5 ％。其原因在于胰腺癌細(xì)胞不僅增殖迅速，更重要的是有極強(qiáng)的侵襲及轉(zhuǎn)移能力。手術(shù)仍然是胰腺癌的主要治療方法，然而近8 0 ％左右的病人在明確診斷后已經(jīng)有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移或者不可切除的局部轉(zhuǎn)移而失去了手術(shù)適應(yīng)癥。其預(yù)后差的原因在于術(shù)后局部復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。因此，對(duì)胰腺癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制的研究成為重中之重。然而至今其侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制仍未完全闡明。在惡

4、性腫瘤中，蛋白質(zhì)翻譯后修飾的生化過程對(duì)細(xì)胞功能調(diào)控起到重要作用，至今其作用機(jī)制未完全明確。蛋白質(zhì)磷酸化為其翻譯后修飾的一種方式。因此明確腫瘤細(xì)胞磷酸化對(duì)其生物學(xué)功能調(diào)控的作用具有重要意義。在我們的先前研究中，針對(duì)同源性胰腺癌細(xì)胞( 高侵襲轉(zhuǎn)移性質(zhì)的P C ．1 ．0 和低侵襲轉(zhuǎn)移性質(zhì)的P C 。1 ) ，我們利用磷酸化蛋白芯片技術(shù)篩選這兩種細(xì)胞中表達(dá)具有差異的蛋白及磷酸化位點(diǎn)，并對(duì)其中4 5 2 個(gè)蛋白的5 8 2 個(gè)磷酸化位點(diǎn)進(jìn)行比對(duì)

5、，其中R A F ．1 在T y r - 3 4 1位點(diǎn)上P C 一1 ．0 和P C 一1 細(xì)胞中磷酸化水平之比為2 ．6 8 。這一結(jié)果表明R A F 一1 可能有調(diào)控胰腺癌的侵襲轉(zhuǎn)移的作用。R A F 一1 ，又稱C —R A F ，是一種原癌基因，據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，R A F ．1 在乳腺癌、結(jié)直腸腫瘤、非小細(xì)胞肺癌等腫瘤中表達(dá)量上調(diào)。R A F ．1 蛋白為一種絲氨酸／蘇氨酸激酶，連接上游R A S 蛋白及下游M E K l ／2

6、，調(diào)控M A P K 級(jí)聯(lián)反應(yīng)。它決定細(xì)胞多種過程包括增殖、分化、凋亡、存活以及致癌性轉(zhuǎn)化。通過一系列的磷酸化，R A F ．1的活化導(dǎo)致M E K 一1 和M E K ．2 ( M A P 2 K 1 ／M E K l 和M A P 2 K 2 ／M E K 2 ) 激活，進(jìn)而激活E R K l ／2 ，最終激活M A P K 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。而另一種蛋白A K T ，同樣由通過磷酸化蛋白芯片技術(shù)篩選出來，在S e r l 2 4 位點(diǎn)

7、上個(gè)P C ．1 ．O 和P C ．1 細(xì)胞中磷酸化水平之比為O ．3 7 ．A K T 為另一條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路P 1 3 K —P T E N ．A K T 的一員，調(diào)控與R A F 一1 相似的生物學(xué)過程。P 1 3 K ／P T E N ／A k t 和M A P K 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是現(xiàn)今公認(rèn)的胰腺癌中的活化通路。這些通路具有調(diào)控細(xì)胞增殖，衰老和凋亡的作用。并使細(xì)胞具有耐藥性。M A P K信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是細(xì)胞外信號(hào)傳遞入核的重要通路，