內(nèi)蒙古林區(qū)媒介蜱攜帶病原體的調(diào)查研究.pdf

1、一.研究背景：
　　蜱媒傳染?。═ick-borne infectious diseases）是一類由媒介蜱傳播、感染所引發(fā)的自然疫源性疾病。蜱攜帶和傳播的病原體種類數(shù)量繁多（包括病毒、細(xì)菌、立克次體、螺旋體等）、宿主動(dòng)物分布廣泛、流行環(huán)節(jié)復(fù)雜交錯(cuò)，且易受到自然環(huán)境和社會(huì)經(jīng)濟(jì)條件的影響，幾種蜱傳疾病往往共存于同一疫源地，一種媒介蜱也可同時(shí)攜帶兩種或兩種以上的病原體，這極大的增加了宿主動(dòng)物及人類復(fù)合感染的機(jī)率，極易造成蜱傳疾病的流行

2、和暴發(fā)。自1982年以來，我國已發(fā)現(xiàn)33種新發(fā)蜱媒傳染病病原體[1-7]，包括3種無形體（Anaplasma）、3種埃里克體（Ehrlichia）、8種斑點(diǎn)熱群立克次體(spotted fever group rickettsiae,SFGR)、6種伯氏疏螺旋體（Borrelia burgdorferi sensu lato）、11種巴貝西蟲（Babesia）及發(fā)熱伴血小板減少綜合征病毒(severe fever with thromb

3、ocytopenia syndrome virus,SFTSV)，其中15種新發(fā)蜱傳病原體可以導(dǎo)致人類感染（新發(fā)蜱媒傳染病第一時(shí)間被確認(rèn)的地點(diǎn)和時(shí)間，附錄1[82]）。
　　萊姆?。↙yme disease，LD）是20世紀(jì)70年代發(fā)現(xiàn)的由伯氏疏螺旋體（Borrelia burgdorferi sensu lato，Bb）引起的一種蜱媒傳染病。現(xiàn)報(bào)告已有70多個(gè)國家和地區(qū)存在本病或自然疫源地，在美國萊姆病又被稱作“第二艾滋病”，世

4、界衛(wèi)生組織已將其列為需要重點(diǎn)進(jìn)行研究和防治的新發(fā)傳染病。我國自1986年發(fā)現(xiàn)萊姆病自然疫源地以來，通過病原學(xué)檢測已證實(shí)有19個(gè)省、市和自治區(qū)存在萊姆病的自然疫源地，9種蜱可攜帶和傳播伯氏疏螺旋體，8種野鼠、狗、牛、羊和野兔體內(nèi)存在自然感染。近年來，我國萊姆病患者每年都有上萬余例報(bào)道，其危害性和嚴(yán)重性日益受到人們關(guān)注。斑點(diǎn)熱是由立克次體屬（Rickettsia）的斑點(diǎn)熱群立克次體（spotted fever group Rickettsi

5、ae,SFGR）引起的一類以急性發(fā)熱和全身皮疹為主要特征的疾病總稱。SFGR是立克次體目中最大最復(fù)雜的一個(gè)群種，是一種全球性分布、嚴(yán)格血管內(nèi)皮細(xì)胞寄生的小桿菌，革蘭氏染色陰性，到目前為止能引起人類感染的SFGR至少19種。我國已在10多個(gè)省、市、自治區(qū)證實(shí)有SFGR感染，并且發(fā)病地區(qū)及范圍不斷擴(kuò)大和變遷。近年來，新種SFGR及其所引致的斑點(diǎn)熱在我國和世界各地不斷發(fā)現(xiàn)和報(bào)道。內(nèi)蒙大興安嶺林區(qū)自然資源豐富，生態(tài)系統(tǒng)物種多樣，并以其獨(dú)特的地理

6、優(yōu)勢和自然景觀適宜蜱類棲息，是我國蜱媒傳染病主要疫區(qū)之一[8]，隨著林區(qū)天然林保護(hù)工程實(shí)施和產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整，林下資源開發(fā)逐漸增多，森林采伐量逐年減少，帶動(dòng)當(dāng)?shù)亟?jīng)濟(jì)不斷發(fā)展的同時(shí)，林區(qū)旅游業(yè)也迅速升溫。隨著進(jìn)入林區(qū)人群的增加，人們被蜱蟲叮咬、感染的機(jī)率就不斷增多，發(fā)病率也越來越來高。因此，蜱媒傳染病對(duì)在內(nèi)蒙古林區(qū)從事經(jīng)濟(jì)開發(fā)、野外生產(chǎn)活動(dòng)、旅游、野營、軍事訓(xùn)練以及國防建設(shè)的人群威脅極大。
　　二.研究目的：
　　通過本研究進(jìn)一步

7、了解我國內(nèi)蒙古大興安嶺林區(qū)蜱中疏螺旋體和SFGR感染情況，補(bǔ)充和完善媒介蜱攜帶病原體的多樣性和復(fù)雜性，為更好的防治蜱媒傳染病提供可以借鑒的新思路。
　　三.研究方法
　　本研究選取內(nèi)蒙古畢拉河林區(qū)（北緯N49°25′48.52″，東經(jīng)E123°32′15.82″）、庫都爾林區(qū)（北緯N50°01′35.64″，東經(jīng)E121°36′58.73″）和奇乾林區(qū)（北緯N52°11′45.30″，東經(jīng)E120°46′21.42″）為調(diào)查

8、點(diǎn)，廣泛采集全溝硬蜱（Ixodes persulcatus），森林革蜱（Dermacentor silvarum）和嗜群血蜱（Haemaphysalis conicinna）等多種蜱種，采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）方法對(duì)疏螺旋體和SFGR感染及其基因分型進(jìn)行研究。
　　四.研究結(jié)果：
　　本研究我們?cè)诋吚?、庫都爾和奇乾三個(gè)林區(qū)共采集蜱標(biāo)本792只，其中全溝硬蜱723只（91.29％）、森林革蜱48只（6.06%），嗜群血蜱

9、21只（2.65%）。庫都爾林區(qū)和奇乾林區(qū)均以全溝硬蜱為優(yōu)勢蜱種（χ2=202.405，p=0.000），提示全溝硬蜱是該林區(qū)蜱媒傳染病的主要傳播媒介之一。PCR檢測發(fā)現(xiàn)，蜱標(biāo)本中疏螺旋體陽性攜帶率為35.35%，全溝硬蜱、森林革蜱、嗜群血蜱中攜帶疏螺旋體感染分別為276只（38.17%）、2只（4.17%）、2只（9.52%）；基因分型結(jié)果顯示有5種基因型別：B.garinii型，陽性蜱212只（陽性率26.77%）；B.afzeli

10、i型，陽性蜱53只（陽性率6.69%）；B.miyamotoi型，陽性蜱13只（陽性率1.64%）；B.spielmanii型，陽性蜱1只（陽性率0.12%）；Borrelia sp.NM517（B.sp.NM517）型，陽性蜱1只（陽性率為0.12%）。其中B. miyamotoi、B.spielmanii和B.sp.NM517三種基因型均為我國首次發(fā)現(xiàn)。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析表明B.garinii為我國大興安嶺林區(qū)萊姆病伯氏疏螺旋體優(yōu)勢基因型

11、（χ2=19.433，p=0.013）。另外，結(jié)果發(fā)現(xiàn)蜱標(biāo)本中SFGR陽性攜帶率為40.4%，全溝硬蜱、森林革蜱、嗜群血蜱中SFGR感染分別為283只（39.14%）、28只（58.33%）、9只（42.86%），基因分型結(jié)果顯示有3種基因型：新塔拉塞維奇立克次體(Candidatus Rickettsia tarasevichiae，CRT），陽性蜱284只（陽性率35.86%）；勞氏立克次體（Rickettsia raoultii，

12、R.raoultii），陽性蜱33只（陽性率4.17%）；黑龍江立克次體（Rickettsiahelongjiangii，R.helongjiangii），陽性蜱3只（陽性率0.38%）。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，內(nèi)蒙古大興安嶺三個(gè)林區(qū)SFGR不同基因型陽性感染差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=82.474，p=0.000），庫都爾林區(qū)和奇乾林區(qū)均以CRT為SFGR優(yōu)勢基因型，畢拉河林區(qū)以R.raoultii為優(yōu)勢基因型。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示，三個(gè)蜱種不同基因

13、型SFGR的感染差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=251.838，p=0.000），全溝硬蜱和嗜群血蜱中CRT基因型為蜱攜SFGR優(yōu)勢基因型，森林革蜱中R.raoultii為蜱攜SFGR優(yōu)勢基因型。研究也發(fā)現(xiàn)媒介蜱存在疏螺旋體和SFGR的復(fù)合感染，復(fù)合感染率為14.52%（115只）。
　　五.研究結(jié)論：
　　本研究結(jié)合現(xiàn)場調(diào)查、實(shí)驗(yàn)室檢測，綜合應(yīng)用描述性和分析性流行病學(xué)等方法，對(duì)內(nèi)蒙古大興安嶺林區(qū)媒介蜱中攜帶病原體的感染情況進(jìn)行了

14、深入調(diào)查，調(diào)查發(fā)現(xiàn)全溝硬蜱為當(dāng)?shù)貎?yōu)勢蜱種。蜱中可單獨(dú)或混合存在疏螺旋體（B.garinii型、B.afzelii型、B.miyamotoi、B.spielmanii、B.sp.NM517）和SFGR（CRT型、R.raoultii型、R.heilongjiangii型）感染。
　　本研究首次在我國發(fā)現(xiàn)了疏螺旋體B.miyamotoi、B.spielmanii和B.sp.NM517三個(gè)基因型，其中B.miyamotoi屬于疏螺旋體屬

15、中的回歸熱螺旋體，主要寄生在硬蜱中，常與B.afzelii、B.garinii等基因型在蜱中混合感染。B.spielmanii屬于疏螺旋體屬中的伯氏疏螺旋體，是新型人類致病性病原體。B.sp.NM517型序列同B.Theileri strain KAT16s ribosomal RNA的序列相似度為98.77%，是一種新的基因型，但還未對(duì)其進(jìn)行分離培養(yǎng)，這有待于進(jìn)一步深入研究。
　　本研究結(jié)果不僅為我國內(nèi)蒙古大興安嶺林區(qū)媒介蜱攜帶