一次性力竭運動對骨骼肌抗氧化防御功能和自噬相關(guān)基因表達的影響.pdf

1、細胞自噬(autophgy)簡稱自噬，是將細胞內(nèi)受損的細胞器、老化的蛋白質(zhì)等進行降解、消化的過程，絕大多數(shù)真核細胞都存在此現(xiàn)象。通常來說，穩(wěn)定的細胞自噬有助于保持機體的穩(wěn)定狀態(tài)，應激時細胞自噬會被激活，吞噬有毒或致癌的物質(zhì)，抑制細胞發(fā)生癌變;但過度自噬會損傷細胞并使機體紊亂。運動訓練對細胞自噬的調(diào)控作用是雙向的，若運動訓練強度適宜，那么細胞自噬水平會上調(diào)，降解由運動訓練積累的破損的細胞器和折疊錯誤的蛋白質(zhì)，為骨骼肌代謝提供一定的能量和合

2、成過程中所需要的底物;若過度運動，細胞自噬過度激活，從而過度降解細胞器、蛋白質(zhì)等，導致細胞損傷，甚至誘發(fā)自噬性細胞死亡。近幾年關(guān)于細胞自噬的研究越來越多，發(fā)現(xiàn)細胞自噬對機體穩(wěn)定、細胞生成與代謝、組織重建與合成有重要意義，并且對機體抗氧化、抗衰老、神經(jīng)退行性變化、骨骼肌等相關(guān)疾病均有調(diào)控作用。目前，關(guān)于運動對骨骼肌自噬相關(guān)基因表達和抗氧化方面的研究意見并不一致。有人研究發(fā)現(xiàn)，耐力運動增強骨骼肌抗氧化防御能力，同時激活骨骼肌自噬基因的表達;

3、但也有相反的報道，耐力運動并不能引起大鼠骨骼肌自噬基因表達。為了進一步了解運動對骨骼肌細胞自噬的影響，本課題通過運動干預探討骨骼肌自噬和抗氧化防御功能的變化，為合理制定運動訓練過程中的運動強度和運動持續(xù)時間提供理論依據(jù)。
　　目的:通過一次性力竭運動建立急性運動負荷模型，檢測ICR小鼠骨骼肌抗氧化功能的變化及其自噬相關(guān)基因Atg5、Atg7、LC-3和Beclin1表達水平的變化，進一步闡述一次性力竭運動對骨骼肌抗氧化水平和自噬的

4、影響機理，預期成果為合理安排運動訓練強度、疲勞恢復提供實驗依據(jù)。
　　方法:30只健康雄性ICR小鼠，4-5周齡，體重25.17±2.46g，隨機分為安靜對照組(Control)和一次性力竭運動組。其中，一次性力竭運動組又根據(jù)取材時間分為0h組、6h組、12h組和24h組。小鼠進行適應性跑臺運動，速度20m/min，持續(xù)時間30min，共訓練3天。正式訓練時按照以下程序進行:第1級負荷:速度10m/min，運動15min;第2級負

5、荷:15m/min，運動15min;第3級負荷:20m/min，然后運動組小鼠一直運動至力竭。力竭的標準:小鼠不能維持預設(shè)的速度，停留于跑道末端，用電刺激驅(qū)趕無反應。采用Tecan Infinite M200酶標儀測定骨骼肌T-SOD活性、Cu-ZnSOD活性、MnSOD活性、MDA含量、T-AOC含量。Real-timePCR測定小鼠骨骼肌自噬相關(guān)基因Atg5、Atg7、LC-3和Beclin1的mRNA表達水平。
　　結(jié)果:①

6、與對照組相比，運動后即刻(0h)、6h小鼠Atg5mRNA的mRNA表達水平有上升趨勢，12h、24h有下降趨勢，但均無統(tǒng)計學意義(p＞0.05);②與對照組相比，運動后即刻(0h)、6h小鼠Atg7mRNA的mRNA表達水平有上升趨勢，12h、24h有下降趨勢;在12h有極顯著性差異(p＜0.01)，其余時間點均無統(tǒng)計學意義(p＞0.05);③與對照組相比，運動后即刻(0h)、12h、24h小鼠LC-3mRNA表達水平有下降趨勢，6h

7、有上升趨勢，但均無統(tǒng)計學意義(p＞0.05);④與對照組相比，運動后即刻(0h)、6h、24h小鼠Beclin1 mRNA表達水平有上升趨勢，12h有下降趨勢;在0h、6h有極顯著性差異(p＜0.01)，其余時間點均無統(tǒng)計學意義(p＞0.05);⑤與對照組相比，運動后即刻(0h)、6h、12h小鼠T-SOD活性有下降趨勢，24h與對照組一樣;在6h有顯著性差異(p＜0.05)，其余時間點均無統(tǒng)計學意義(p＞0.05);⑥與對照組相比，運

8、動后即刻(0h)、24h小鼠Cu-ZnSOD活性有上升趨勢，6h、12h有下降趨勢;在0h、6h有顯著性差異(p＜0.05)，其余時間點均無統(tǒng)計學意義(p＞0.05);⑦與對照組相比，運動后即刻(0h)小鼠MnSOD活性有上升趨勢，且有極顯著性差異(p＜0.01);其余時間點均無變化也無統(tǒng)計學意義(p＞0.05);⑧與對照組相比，運動后即刻(0h)、6h、12h、24h小鼠MDA含量均有下降趨勢，但均無統(tǒng)計學意義(p＞0.05);⑨與對