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文檔簡介
1、目的:運動、HIF和ERR與機體能量代謝及相關(guān)代謝性疾病都有關(guān)系,但三者之間的具體關(guān)系和相互作用機制及其共同對能量代謝的調(diào)節(jié)目前并不十分清楚。本實驗通過對陰性對照型小鼠、HIF-1α基因低表達小鼠以及HIF-1α基因高表達小鼠進行1小時和6小時一次性耐力運動,檢測各組小鼠骨骼肌ERRα和ERRγ核蛋白及其靶基因mRNA的表達,探討不同時間一次性耐力運動HIF-1α對ERRα和ERRγ核蛋白及其下游靶基因的影響,以進一步揭示HIF-1α與
2、一次性耐力運動骨骼肌ERRα、ERRγ糖脂代謝調(diào)節(jié)的關(guān)系。
方法:陰性對照小鼠和HIF-1α基因高、低表達鼠各30只,根據(jù)體重,每組10只,隨機分為3組,分別為安靜組、1h運動組和6h運動組,共9組。做一次性跑臺運動,速度20m/min,坡度5%,運動組運動時間分別為1h和6h。正式試驗前兩天,運動組小鼠進行10min適應(yīng)性的跑臺運動。為了保證小鼠跑臺跑運動強度,在運動過程中采用聲音刺激和用棍棒刺激動物尾部。在整個運動過程中未
3、對動物使用任何電刺激。運動組運動后3小時取材。Western blot法測定ERRα、ERRγ核蛋白含量。Real-Time PCR法測定MCAD、PPARα和NRF1的mRNA含量。
結(jié)果:(1)相對安靜組,一次性耐力運動1小時和6小時,陰性對照鼠的核蛋白ERRα、ERRγ及其靶基因mRNA表達均有增加,且6小時比1小時增加幅度大(2)安靜狀態(tài)下,HIF-1α基因低表達鼠的核蛋白ERRα、ERRγ及其靶基因mRNA表達增加,
4、高表達鼠的反而減少(3)一次性耐力運動1小時,HIF-1α基因低表達鼠的核蛋白ERRγ表達及其靶基因增加,高表達鼠的反而減少(4)一次性耐力運動6小時,轉(zhuǎn)基因鼠的核蛋白ERRα、ERRγ及其靶基因mRNA表達變化不明顯。
結(jié)論:(1)隨運動時間的延長,小鼠骨骼肌ERRα/γ核蛋白表達增加;(2)HIF-1α的蛋白表達量的適度增加,有助于促進安靜鼠骨骼肌核蛋白ERRα/γ蛋白及其靶基因mRNA的表達,而HIF-1α蛋白的過度表達
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